Thermo Scientific Pierce Trypsin/Lys-C Protease Mix, MS-Grade ist eine Serin-Endoproteinase-Mischung aus Trypsin und LysC in MS-Qualität, die zur gleichzeitigen Verdauung von Proteinen verwendet werden kann und eine effizientere Verdauung bietet als Trypsin allein.
Merkmale des Pierce Trypsin/Lys-C Protease-Mix, MS-Qualität:
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Verbesserter Verdau – Die Enzymkombination reduziert versäumte tryptische Spaltungen
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Praktisch – Trypsin- und LysC-Proteasen mit einem für den Verdau optimierten Verhältnis in einem kombinierten Anwendungsformat
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Außergewöhnliche Selektivität – Trypsin weist eine Spezifität für C-terminales Lysin von > 95 % auf; LysC verfügt über eine C-terminale Lysin-Spaltspezifität von > 90 %
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Stabil – Enzymgemisch in gefriergetrocknetem Format
Protein-Charakterisierung, Identifikation und Quantifizierung durch MS beginnt mit einem effizienten, reproduzierbaren Proteinverdau. Obwohl Trypsin routinemäßig für die Proteinverdauung verwendet wird, reicht diese Protease allein nicht aus, um Proteine am Carboxyl-Ende der Lysin- und Arginin-Reste vollständig zu verdauen. Daher wird Lys-C-Protease häufig mit Trypsin kombiniert, um Proteine mit weniger versäumten Spaltungen nacheinander zu verdauen. Der Pierce Trypsin/Lys-C Protease-Mix ist eine gefriergetrocknete Mischung aus Trypsin- und LysC-Proteasen, die optimiert wurde, um die Proteinverdauung zu verbessern. Sie ist in flexiblen Formaten von 20 µg, 5 × 20 µg oder 100 µg erhältlich und ist auch im EasyPep Mini MS Probenvorbereitungskit enthalten.
Die Trypsin-Protease in MS-Qualität in diesem Mix wird aus Schweinepankreas-Extrakten gewonnen und wurde mit TPCK behandelt, um die chymotryptische Aktivität zu eliminieren, und methyliert, um die Stabilität während der Verdauung zu verbessern. Die Lys-C Protease in MS-Gütegrad ist ein stark aufgereinigtes natives Enzym aus
Lysobacter enzymogenes. Im Gegensatz zu Trypsin kann Lys-C Lysine aufspalten, gefolgt von Prolinen, sodass es in Kombination mit anderen Proteasen hervorragend für einen optimalen Proteinverdau geeignet ist. Bei Verwendung als Mischung kann die Verdauung in nur 1,5–3 Stunden oder über Nacht, je nach Enzym/Protein-Verhältnis, abgeschlossen werden. Dieses gefriergetrocknete Enzymgemisch ist bei Lagerung bei -20 °°C ein Jahr lang stabil.
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