La ligasa de ADN T4 cataliza la formación de enlaces fosfodiéster en presencia de ATP entre ADN bicatenario con extremos 3´-hidroxilo y 5´-fosfato. El exclusivo tampón de ligasa de ADN T4 optimiza la ligadura, que puede realizarse en 5 minutos (1). Los ácidos nucleicos de una sola cadena no son sustratos para esta enzima. Hay disponible un boletín técnico para ligasa de ADN T4. Aplicaciones: Clonación (ligación con extremo romo o extremo cohesivo) (2). Adición de enlaces o adaptadores a ADN de extremo romo (2).
Fuente: Purificado a partir E. coliœ lisógeno NM989.
Pruebas de rendimiento y calidad: Ensayos de endodesoxirribonucleasa y exdesoxirribonucleasa 3´ y 5´; ligadura de eficacia probada.
Definición de la unidad: Una unidad cataliza el intercambio de pirofosfato marcado como 1 nmol 32P en ATP en 20 min a 37 °C. (Una unidad es igual a aproximadamente 300 unidades de ligadura de extremo cohesivo.)
Condiciones de reacción de la unidad: 66 mM de Tris-HCl (pH 7,6), 6,6 mM de MgCl2, 10 mM de DTT, 66 µM de ATP, pirofosfato marcado como 3,3 µM 32P y enzima en 0,1 ml durante 20 min a 37 °C.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Especificaciones
Concentración
5 U/μl
Condiciones de envío
Hielo seco
Enzima
Ligasa
Tampón compatible
Tampón de reacción 5X
Cantidad
250 U
Tipo de producto
T4 DNA Ligase
Contenido y almacenamiento
ADN ligasa T4 se suministra con un vial de tampón de reacción 5X [250 mm de Tris-HCl (pH de 7,6), 50 mm de MgCl2, 5 mm de ATP, 5 mm de DTT, polietilenglicol-8000 al 25 % (p/v)]. Almacenar a -20 °C.
Figuras
Documentos y descargas
Certificados
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