Transcriptasa inversa SuperScript™ IV

La transcriptasa inversa (RT) SuperScript™ IV es una mutación del virus de la leucemia murina Moloney (M-MLV) patentada que presenta una mayor resistencia y fiabilidad en reacciones de RT. Respecto a SuperScript™ III, ha mejorado ostensiblemente en resistencia al inhibidor, capacidad de procesamiento y velocidad de reacción, al tiempo que conserva todas las ventajas de la enzima anterior, incluido el aumento de la termoestabilidad, la síntesis de ADNc de longitud completa altamente eficaz y la reducción de la actividad de ARNasa. La RT SuperScript™ IV está diseñada para proporcionar una síntesis fiable, uniforme y rápida de ADNc en presencia de inhibidores que se encuentran en una gran variedad de muestras que provocan que otras RT disponibles actualmente resulten ineficaces.

La RT SuperScript™ IV es la mejor elección para todas las aplicaciones de transcripción inversa y reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR) y qRT-PCR de la familia de productos SuperScript™. Se recomienda especialmente cuando la reproducibilidad y la fiabilidad son el principal objetivo y cuando los inhibidores de la muestra de ARN pueden interferir en la síntesis de ADN complementario, lo que provocaría sesgos en los estudios de expresión génica.

Entre las características de la transcriptasa inversa SuperScript™ IV se incluyen las siguientes:
• Resistencia significativamente mejorada a una gran variedad de inhibidores que pueden interferir con la síntesis de ADNc
• Síntesis sólida y específica de ADNc en una amplia gama de tipos de muestras
• Una reacción de transcriptasa inversa más rápida que reduce el tiempo de incubación de > 50 minutos a 10 minutos
• Significativamente mejor procesividad en comparación con la SuperScript™ III RT

Fuente
Purificada a partir de E. coli que expresa el gen pol de M-MLV, modificada para aumentar la termoestabilidad, la vida media, la procesividad, la resistencia a los inhibidores y para reducir la actividad de la ARNasa H.

Pruebas de rendimiento y calidad
Ensayos de endodeoxirribonucleasa, exodeoxirribonucleasa y ribonucleasa; y rendimiento y longitud del producto de ADNc.

Definición de la unidad
Una unidad de SuperScript™ IV RT es la cantidad de enzima necesaria para incorporar 1 nmolo de desoxirribonucleótido en el material ácido precipitable en 10 minutos a 37 °C utilizando poli(A) oligo(dT)_12-18 como plantilla/primer.

Condiciones de reacción unitarias
50 mm Tris-HCl (pH 8,3), 4 mm MgCl², 10 mm DTT, 50 mm KCl, 0,5 mm dTTP, 0,4 MBq/ml [³H]-dTTP, 0,4 mm poli(A) oligo (DT) _12-18 y enzima en 20 μl durante 10 minutos a 37 °C.