El kit Thermo Scientific EZ-Link de biotinilización de sulfo-NHS Micro contiene reactivos suficientes para ocho reacciones de biotinilación (por ejemplo, 0,05–0,2 mg de anticuerpos por reacción). El reactivo sulfo-NHS-biotina EZ-Link incluido en el kit es un reactivo de biotinilación soluble en agua de cadena corta utilizado para etiquetar anticuerpos, proteínas y otras moléculas que tienen aminas primarias.

Características del Sulfo-NHS-biotina EZ-Link:

• Etiquetado de proteína: anticuerpos de biotinilato para facilitar la inmovilización, purificación o detección utilizando resinas de estreptavidina o sondas
• Etiquetado de la superficie celular: proteínas de superficie de biotinilato de células completas, ya que el reactivo cargado negativamente no penetra en las membranas celulares
• Reactivo a amina: reacciona con aminas primarias (-NH2), como las cadenas laterales de lisina o el extremo amino de polipéptidos
• Soluble: el grupo sulfo-NHS cargado aumenta la solubilidad en agua del reactivo en comparación con los compuestos de éster de N-hidroxisucinimida (NHS) corrientes
• Irreversible: forma de enlaces amida permanentes; el agente separador no se puede escindir
• Muy corto: el brazo del separador (longitud total añadida al objetivo) es de 13,5 angstroms; se compone de un grupo de ácido valérico de la biotina natural

La biotina sulfo-NHS es la más corta de tres reactivos EZ-Link muy similares que son solubles en agua y no divisibles y que permiten una biotinilización de anticuerpos, proteínas y cualquier otra macromolécula que contenga aminas primarias en solución. El etiquetado específico de proteínas de la superficie celular es otra aplicación común de estos reactivos exclusivos solubles en agua que no permean las membranas. Con la única diferencia de la longitud de su brazo del separador, los tres reactivos de éster de Sulfo-NHS ofrecen la posibilidad de optimizar experimentos de etiquetado y detección donde la repulsión estérica de la unión de biotina es un factor importante. La biotina sulfo-NHS se ofrece en varios tamaños de envase y como kits completos de etiquetado de proteínas.

Elaboramos reactivos de biotina para garantizar los niveles más altos posibles de integridad, uniformidad y rendimiento del producto para aplicaciones de investigación específicas.

Los ésteres de N-hidroxisulfosuccinimida (NHS) de biotina son el tipo más popular de reactivo de biotinilización. Las biotinas activadas por NHS reaccionan eficazmente con grupos amino primarios (-NH2) en tampones alcalinos para formar enlaces amida estables. Las proteínas (como los anticuerpos) suelen tener varias aminas primarias que están disponibles como objetivos de etiquetado, incluyendo la cadena lateral de residuos de lisina (K) y el extremo N de cada polipéptido.

Las variedades de reactivos de éster de NHS de biotina difieren en longitud, solubilidad, permeabilidad celular y capacidad de escisión. Las biotinas de NHS no sulfonadas permean las células, pero deben disolverse en disolvente orgánico, como DMSO o DMF. Las biotinas de sulfo-NHS (y aquellas con separadores pegilados) son solubles en agua directamente, pero no permean las membranas. Las variedades que contienen enlaces disulfuro se pueden escindir mediante agentes reductores, lo que permite desconectar el grupo de biotina de la proteína etiquetada.

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