El kit de ensayo de Bradford compatible con detergentes Pierce es una modificación rápida y lista para usar del conocido método colorímetro de unión de colorante Coomassie para la cuantificación de proteínas totales. Los aditivos únicos del reactivo de Bradford lo hacen compatible con hasta un 1 % o más de detergentes y reactivos de lisis que se utilizan comúnmente en la investigación de ciencias de la vida, incluyendo Triton X-100 y NP-40.
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Flexible: compatible con muestras con y sin detergente
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Volumen de muestra: solo se necesitan 10 µl para el procedimiento en microplaca
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Colorimétrico: medición con un espectrofotómetro estándar o lector de placas a 595 nm
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Listo para usar: un solo reactivo, no es necesaria la preparación de un reactivo de trabajo
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Tiempo de ensayo: incubación de 10 minutos a temperatura ambiente
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Intervalo de ensayo: detecta la concentración de proteínas en un intervalo de 2 a 1500 µg/ml
Similar al método de Bradford, el colorante Coomassie une la proteína en un medio ácido, lo que provoca un cambio inmediato en la absorción máxima de 465 nm a 595 nm con un cambio de color concomitante de verde a azul. Además, el ensayo se completa en solo 10 minutos.
El ensayo de proteínas se puede realizar en formato de tubo de ensayo o microplaca. El intervalo de trabajo estándar oscila entre 100 y 1500 µg/ml con hasta un 1 % de detergente (o superior en algunos casos). Las concentraciones de proteínas se calculan según las absorbancias obtenidas para una serie de diluciones de proteínas estándar, normalmente seroalbúmina bovina (BSA), que se ha analizado junto con muestras desconocidas. Puesto que la respuesta de color con el colorante Coomassie es no lineal con un aumento de la concentración de proteínas, se debe completar una curva estándar con cada ensayo. Se pueden utilizar patrones directamente sin necesidad de prepararlos en el mismo detergente que se encuentra en las muestras de prueba.
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