El kit de estimación de carbohidratos de glicoproteínas Thermo Scientific Pierce permite medir la cantidad de glicosilación de una proteína en forma de porcentaje de la masa de proteína purificada total.
Características del kit de estimación de carbohidratos de glicoproteínas:
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Cualitativo: identifica fácilmente proteínas purificadas como glicoproteínas, o muestras como contaminadas por azúcares
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Semicuantitativo: estima el contenido porcentual de carbohidratos (p/p) de la glicoproteína purificada mediante la comparación con el conjunto incluido de patrones de glicoproteínas
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Procedimiendo sencillo: realizado en menos de 75 minutos; las instrucciones incluyen protocolos para microplacas y para tubos de ensayo
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Adaptable: el formato de curva patrón permite diseñar pruebas alternativas para componentes de aldehídos y carbohidratos
El kit de estimación de carbohidratos de glicoproteínas incluye seis patrones de glicoproteínas purificadas y los reactivos de ensayo necesarios para estimar eficazmente la cantidad de glicosilación oxidativa (% de carbohidrato por peso) de muestras de proteínas purificadas. En primer lugar se oxidan con metaperiodato sódico los grupos de azúcares de la muestra de glicoproteína, para producir grupos aldehídos detectables. Entonces se hace reaccionar la muestra con el reactivo de detección colorimétrica de glicoproteínas. A continuación se mide la absorbencia del producto de reacción púrpura resultante a 550 nm con un espectrofotómetro o un lector de placas. Por último se calcula el contenido de carbohidratos de la glicoproteína mediante la comparación con los resultados de los cinco patrones de glicoproteínas incluidos en el kit.
Aplicaciones• Determinar si un anticuerpo policlonal purificado u otra proteína están glicosilados antes de intentar realizar procesos químicos de conjugación o inmovilización basados en carbohidratos con reactivos de hidracida
• Caracterizar y clasificar fracciones de proteínas purificadas de un procedimiento de afinidad
• Evaluar la contaminación por azúcares y carbohidratos de muestras de proteínas no glicosiladas
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