El kit de ensayo colorimétrico de proteasas Thermo Scientific Pierce mide la actividad de las proteasas totales en muestras, lo que permite evaluar el progreso de procedimientos de aislamiento de proteasas o cuantificar la contaminación por proteasas en muestras biológicas. Este kit utiliza caseína completamente succinilada como sustrato para el ensayo. La hidrólisis de este sustrato en presencia de proteasa provoca la liberación de fragmentos de péptidos con grupos amino terminales libres. Estos péptidos reaccionan con ácido trinitrobencenosulfónico (TNBSA), tras lo que se mide el incremento de absorbencia producido por la formación de aductos TNB-péptidos de color amarillo.

Características del kit de ensayo de proteasas colorimétrico:

• Sustrato de caseína: mide la actividad de cualquier proteasa que escinda la caseína en fragmentos peptídicos
• Patrón de tripsina: cuantifica la actividad proteasa en relación con la tripsina, una referencia universalmente aceptada
• Sensible: 1000 veces más sensible que los ensayos que utilizan formas no modificadas de caseína
• Sencillo y rápido: los protocolos para tubos de ensayos y para microplacas se realizan en menos de una hora
• Homogéneo: con pasos de adición solamente; no requiere pasos de separación, transferencia o parada
• Personalizable: permite adaptar fácilmente el tiempo, la temperatura y el pH para optimizar la sensibilidad a las proteasas de interés

Aplicaciones:
• Evaluar la integridad funcional y el progreso global de la purificación de proteasas
• Cuantificar la contaminación por proteasas en muestras de proteínas
• Caracterizar la actividad de proteasas poco comunes mediante comparación con tripsina
• Evaluar las condiciones de los tampones en relación con sus efectos sobre la función y la actividad de las proteasas

Especificaciones adicionales:
• Sustrato: caseína succinilada (no disponible por separado)
• Base del ensayo: detección de aminas primarias resultantes de la proteólisis
• Reactivo de detección: ácido trinitrobencenosulfónico (TNBSA)
• Medición: absorbencia a 450 nm (lector de placas o espectrofotómetro)

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