El reactivo C de ensayo de peróxido Thermo Scientific Pierce es una formulación que consiste en 125 µm de naranja de xilenol en metanol con BHT. Esta formulación es uno de los componentes del kit de ensayo cuantitativo de peróxido utilizado para detectar y medir los niveles de peróxido de hidrógeno a partir de la oxidación de iones ferrosos a férricos en presencia de naranja de xilenol, presente en las muestras biológicas y otras muestras líquidas.
Características del reactivo B para el ensayo de peróxido:
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Práctico: aunque no se requieren reactivos exclusivos, los kits listos para usar eliminan la variabilidad, dificultad y el gasto añadido de la formulación manual de los reactivos
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Formulaciones compatibles con lípidos: la formulación compatible con lípidos proporciona los mejores resultados con muestras que contienen lípidos sin extraer primero los lípidos; sin embargo, ya que este kit no contiene sorbitol, el ensayo es menos sensible.
Aplicaciones de los kits de ensayo cuantitativo de peróxido Pierce:• Medición general del peróxido de hidrógeno (H2O2) en muestras de proteínas
• Cuantificación de peróxidos en detergentes
• Evaluación de los efectos de los peróxidos en la actividad celular
• Determinación de la glucemia proteica; medición de la acumulación de peróxido en lípidos
En estos kits, los hidroperóxidos convierten el Fe2+ a Fe3+ a pH ácido. Con la formulación compatible con agua, el peróxido reacciona primero con el sorbitol, convirtiéndolo en un radical peroxil, que a su vez inicia la oxidación de Fe2+ a Fe3+. En la formulación compatible con lípidos, el peróxido convierte directamente el Fe2+ a Fe3+. En una solución de ácido sulfúrico, el Fe3+ compleja con el colorante naranja de xilenol (XO) para producir un producto púrpura con una absorbancia máxima a 560 nm. Los niveles de peróxido en las muestras de ensayo pueden determinarse mediante el cálculo del coeficiente de extinción conocido del complejo XO-Fe o mediante referencia a una curva patrón preparada con solución de peróxido de hidrógeno. La mayoría de las proteínas no interfieren con estos ensayos, aunque algunos quelantes de metales pueden requerir el uso de un vacío (es decir, de control) para mitigar estos efectos.
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