La peroxidasa de rábano activada por maleimida Thermo Scientific Pierce sirve para preparar conjugados de HRP con proteínas, péptidos u otros ligandos que contengan grupos sulfhidrilos, como cisteínas reducidas. Este producto contiene 5 mg de proteína conjugada y puede modificar eficazmente 5 mg de inmunoglobulina.

Características de la peroxidasa de rábano activada por maleimida:

• HRP activada: peroxidasa de rábano (HRP) modificada con grupos maleimida para su conjugación con moléculas de sulfhidrilo
• Reactiva al sulfhidrilo: grupos maleimida conjugados con tioles reducidos (-SH), como en la cadena lateral de los residuos de cisteína
• HRP de alta actividad: la actividad enzimática es superior a 240 unidades/mg; liofilizada. La enzima activada es estable durante al menos 12 meses a 4 °C
• Kit completo: incluye la HRP activada, así como dos tipos de reactivos para los anticuerpos (IgG) listos para el sulfhidrilo o las proteínas para la conjugación

Este producto consiste en peroxidasa de rábano (HRP) que ha sido modificado con Sulfo-SMCC (n.º de pieza 22322) para unir varios grupos maleimida por molécula de HRP mientras se mantiene la actividad de la peroxidasa. La HRP activada se unirá covalentemente a proteínas u otras moléculas que contengan grupos sulfhidrilos (por ejemplo, cisteínas). Los conjugados de HRP de anticuerpos, proteínas, péptidos y otras sondas indicadras que contienen tiol se hacen fácilmente con este método. El kit completo incluye la HRP activada, así como dos tipos de reactivos para la preparación de anticuerpos (IgG) listos o proteínas listas para la conjugación.

El kit completo de peroxidasa de rábano activada por maleimida contiene reactivos para exponer o añadir los grupos sulfhidrilos necesarios en anticuerpos (IgG) o prácticamente cualquier otra proteína. Estas estrategias generales se describen brevemente en la sección de aplicaciones de nuestra revisión de la química de reacción de maleimida. Por supuesto, cualquier proteína que contenga cisteínas tiene grupos sulfhidrilos (-SH), pero deben estar reducidos (no en forma de enlaces de disulfuro) para ser conjugados. Los anticuerpos también contienen enlaces de disulfuro que pueden ser utilizados como sitios de etiquetado de anticuerpos; los enlaces de disulfuro de la región bisagra en los IgG pueden escindirse de forma selectiva con el agente reductor suave 2-Mercaptoetilamina (n.º de pieza 20408), que se incluye en el kit completo. También se pueden añadir grupos sulfhidrilos a las proteínas (o a cualquier molécula que contenga aminas) mediante el reactivo SATA (n.º de pieza 26102), que también se incluye en el kit.

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