El sustrato Thermo Scientific Pierce 1-Step Ultra TMB ELISA (1 l) detecta la actividad de la peroxidasa de rábano (HRP), produciendo un cambio de color azul (Amax = 370 nm y 652 nm) a amarillo (Amax = 450 nm) tras añadir una solución de parada de ácido fosfórico o sulfúrico. 1-Step Ultra TMB es el sustrato cromagénico más sensible.

Características del sustrato 1-Step Ultra TMB ELISA:

• Disponible en formulaciones tradicionales o listas para su uso
• No se requieren reactivos ni filtrado
• No cancerígenos
• Diversos niveles de velocidad de desarrollo y sensibilidad para adaptarse a cualquier ensayo
• Reactivos sin dimetilformamida (DMF) ni dimetilsulfóxido (DMSO)

El TMB es el sustrato cromogénico más popular para la detección de HRP en ELISA. Está disponible en varios formatos. Los sustratos 1-Step TMB Pierce son sustratos de un componente que no requieren preparación antes del uso. A diferencia de otros sustratos disponibles en el mercado, estos productos no contienen DMF ni DMSO.
El 1-Step Ultra TMB Thermo Scientific Pierce cuenta con la mayor sensibilidad de los sustratos de TMB, seguido de 1-Step Turbo TMB y 1-Step Slow TMB. La sensibilidad de 1-Step Turbo TMB es similar a la de los sustratos basados en OPD formulados a aproximadamente 1 mg/ml. El 1-Step Slow TMB tiene una sensibilidad intermedia: es más sensible que el ácido 2,2'-azino-bis(3-etilbenzotiazolin)-6-sulfónico (ABTS) y menos sensible que el dihidrocloruro de orto-fenilendiamina (OPD) o el 1-Step Turbo TMB. El 1-Step Slow TMB es un sustrato ideal para estudios cinéticos.

TMB (3,3',5,5'-tetrametilbenzidina) es un cromógeno que produce un color azul cuando se oxida, normalmente como resultado de los radicales de oxígeno producidos por la hidrólisis del peróxido de hidrógeno por HRP. Para los ensayos non-stop ELISA o ELISA cinético, el cromógeno TMB tiene el nivel máximo de absorbancia a 370 nm y 652 nm. El color cambia a amarillo con la adición de ácido sulfúrico o fosfórico con un nivel máximo de absorbancia a 450 nm. Puede surgir un producto de la reacción con color verde como resultado de la conversión parcial del intermediario azul al producto amarillo. TMB es un sustrato para ELISA muy sensible que se oxida más rápido que otros sustratos de HRP, lo que permite un desarrollo del color más rápido.

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