Calcein Blue AM es un colorante de etiquetado de células vivas que penetra en la membrana. Al entrar en la célula, las esterasas intracelulares disocian el grupo de acetoximetil (AM) éster y permiten el acceso del colorante fluorescente sin capacidad de penetrar en la membrana Calcein Blue. Las células apoptóticas y las células muertas, cuyas membranas no están en buenas condiciones, no retienen Calcein Blue. La excitación óptima de Calcein Blue se consigue mediante la línea de láser UV (360 nm), pero también puede excitarse mediante la línea de láser violeta (405 nm) y tiene una emisión máxima de 445 nm que se puede detectar mediante filtros para Pacific Blue™/eFluor™ 450 (450/50). En microscopía de fluorescencia, puede detectarse si se utilizan conjuntos de filtros adecuados. Calcein Blue AM por sí mismo no tiene una fluorescencia muy intensa, por lo que puede ser necesario realizar un paso de lavado adicional para reducir la fluorescencia de fondo. Se recomienda la cotinción con anexina V o 7-AAD para permitir la mayor resolución entre células vivas y células apoptóticas/muertas.

Peso molecular: 465,41
Excitación máxima: 360 nm
Emisión máxima: 445 nm

Calcein Blue AM se debe reconstituir en DMSO de alta calidad y recién abierto.
Tras su reconstrucción, se debe almacenar a - 20 °C con desecante y utilizar en un periodo de tiempo breve. Evitar los ciclos de congelación y descongelación.

Pureza
>90 % basada en HPLC

Aplicación declarada
Análisis mediante citometría de flujo, microscopía