El kit de ensayo de β-galactosidasa de levaduras Thermo Scientific está especialmente formulado para células de levadura y es ideal para identificar interacciones de proteínas in vivo mediante sistemas de doble híbrido.

Características del kit de ensayo de beta-galactosidasa de levaduras:

• Lisis eficiente de células de levadura y un sistema de detección colorimétrico
• Ensayo cuantitativo o cualitativo para colonias de levadura cultivadas en medios sólidos o en suspensión
• La medición del ensayo colorimétrico se realiza fácilmente en un lector de placas o en un espectrofotómetro (de 420 nm)
• Adaptable a formatos de ensayo de microplacas de 96 pocillos o de tubos
• Permite analizar directamente células de medios sólidos o cultivos líquidos sin pasos de recolección o lavado.• Permite realizar análisis de detección homogéneos o medir la actividad secundariamente después de la lisis celular
• También es compatible con lisados preparados a partir de otras especies, como bacterias

El kit de ensayo de β-galactosidasa de levaduras permite la determinación cualitativa o cuantitativa de la actividad de β-galactosidasa en solución directamente a partir de colonias que crecen en un medio sólido. Una parte de la colonia se suspende en una mezcla de reactivo de extracción de proteínas de levaduras Thermo Scientific Y-PER y el tampón de ensayo de β-galactosidasa. Tras un breve periodo de incubación, la solución se vuelve amarilla por la hidrólisis del 0-nitrofenil-β-D-galactopiranósido (ONPG) a 0-nitrofenol (ONP) y galactosa en una solución ligeramente alcalina. El ensayo se convierte en cuantitativo si se calibra para el número de células midiendo la densidad óptica a 660 nm.

El gen que codifica la β-galactosidasa (lacZ) de E. coli se ha utilizado ampliamente como gen indicador en muchos microorganismos procariotas y eucariotas. La actividad de la βgalactosidasa también suele utilizarse como un indicador de interacciones entre proteínas in vivo utilizando sistemas de doble híbrido. La potencia de la interacción se verifica o cuantifica mediante un ensayo de la actividad de la β-galactosidasa.