El kit magnético de marcador c-Myc para IP/Co-IP Thermo Scientific Pierce contiene gránulos magnéticos de inmunoafinidad específicos y reactivos para realizar ensayos de inmunoprecipitación de proteínas de fusión c-Myc o experimentos Co-IP con proteínas cebo marcadas con c-Myc.

A diferencia de los procedimientos tradicionales de IP basados en la captura con gránulo de proteína A/G, este kit utiliza gránulos magnéticos que contienen anticuerpos anti-c-Myc preinmovilizados. Estos gránulos magnéticos anti-c-Myc Pierce garantizan la unión específica de los complejos de proteínas marcados con c-Myc a partir de muestras biológicas. Debido a que el anticuerpo se une covalentemente a las microesferas, las dianas IP se eluyen fácilmente y se recuperan sin contaminación por anticuerpos. El kit de IP completo incluye gránulos magnéticos, tampón de lisis/lavado, tampón de elución de pH bajo, tampón de neutralización, lisado control positivo de la etiqueta c-Myc y tampón de muestra no reductor para SDS-PAGE. Se proporcionan protocolos para flujos de trabajo de separación magnética manual y automático. Se proporcionan suficientes componentes para realizar 40 ensayos IP o de co-IP.

Características del kit magnético de marcador c-Myc para IP/Co-IP:

• Gránulos magnéticos específicos: los anticuerpos monoclonales anti-c-Myc de alta calidad inmovilizados covalentemente permiten una alta producción de los productos de inmunoprecipitación
• Baja unión no específica: los gránulos estables y prebloqueados y el anticuerpo específico minimizan la unión fuera de diana
• Elución sin problemas: el tampón de elución de pH bajo garantiza la recuperación de los complejos de interacción de proteínas de la etiqueta c-Myc sin contaminación por lixiviación de anticuerpos
• Rápido y cómodo: kit completo y con instrucciones fáciles de seguir que proporcionan protocolos optimizados para realizar experimentos de IP o Co-IP en aproximadamente 1 hora
• Versátil: los gránulos magnéticos son compatibles con flujos de trabajo manuales y automáticos de separación magnéticos (p.ej., instrumentos Thermo Scientific KingFisher)

El péptido c-Myc (EQKLISEEDL) derivado de la región de terminal C de la proteína c-Myc humana es una de las varias etiquetas de proteína de fusión utilizadas para la expresión de proteína recombinante. El kit magnético c-Myc para IP/Co-IP Pierce utiliza un anticuerpo específico inmovilizado de alta afinidad (clon 9E10) para la inmunoprecipitación rápida de proteínas de fusión con etiqueta c-Myc a partir de lisados de células bacterianas y de mamífero así como de lisados preparados con los kits de traslación in vitro Pierce Human. Las microesferas se incuban con un lisado de células que contiene proteínas con etiqueta c-Myc, se captura la proteína de fusión y, a continuación, las microesferas se lavan y eluyen usando tampón de elución con pH bajo o tampón de la muestra no reductor. El protocolo y los tampones se han optimizado tanto para las reacciones de IP como para las co-IP, que enriquecen en complejos de interacción de proteínas específicos en las muestras eluidas. El anticuerpo anti-c-Myc se puede utilizar para detectar la proteína marcada con c-Myc mediante análisis Western blot.

Para obtener información sobre la capacidad de unión y otras propiedades de los gránulos magnéticos utilizados en este kit, vea Gránulos magnéticos anti-c-Myc Pierce (n.º de referencia 88842).

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