El kit de etiquetado de ADN con extremo de 3' biotina Thermo Scientific Pierce tiene por objetivo etiquetar cebadores de ADN monocatenarios con biotina para usarlos en ensayos de cambio de movilidad electroforética (EMSA) no radioactivos y otros métodos de detección de ácidos nucleicos.

El procedimiento de biotinilación del ADN utiliza la desoxinucleotidil transferasa terminal (TdT) para catalizar la incorporación de nucleótidos no dirigidos por plantilla en el extremo 3'-OH del ADN monocatenario. TdT muestra una preferencia por el sustrato de ADN monocatenario, pero etiquetará ADN dúplex con salientes de 3' y dúplex romos, aunque con una menor eficiencia.

Características del kit de etiquetado de ADN con extremo de 3' biotina:

• El etiquetado no isotópico elimina la molestia de los materiales radiactivos peligrosos o los residuos difíciles de desechar
• 1-3 ribonucleótidos biotinilados en el extremo de 3' de las cadenas de ADN para reducir la interferencia con la hibridación o la unión específica de secuencia de proteínas
• Las sondas etiquetadas con biotina son estables durante más de un año
• El procedimiento de etiquetado dura 30 minutos y es rápido y eficiente

El kit de etiquetado de ADN con extremo de 3' biotina se ha optimizado para incorporar 1-3 ribonucleótidos biotinilados (Biotina-11-UTP) en el extremo de 3' de los filamentos de ADN. Esta estrategia de etiquetado tiene la ventaja de localizar la biotina en el extremo 3' de la sonda, donde será menos probable que interfiera con la hibridación o la unión de proteínas específica de secuencia. Las sondas de ADN etiquetadas con biotina pueden utilizarse para facilitar la detección no isotópica en una variedad de aplicaciones, entre las que se incluyen los ensayos de cambio de movilidad electroforética (EMSA), los Northern o Southern blots, las hibridaciones de colonias o las hibridaciones in situ.