Los cartuchos de cromatografía de proteína A/G Thermo Scientific™ Pierce™ son dispositivos preenvasados prácticos y listos para usar para el aislamiento y la purificación de la mayoría de las inmunoglobulinas.
La proteína A/G agarosa Pierce es una proteína A/G de fusión recombinante purificada inmovilizada covalentemente en agarosa granulada entrecruzada al 6 % de gran calidad (CL-6B). Esta variedad concreta de resina proporciona la combinación más versátil de funciones cromatográficas para aumentar el rendimiento y conseguir una purificación de alta pureza de la IgG completa procedente de muestras de suero de mamíferos. Los gránulos de agarosa tienen propiedades fisicoquímicas idóneas para muchos sistemas de purificación por afinidad.
Características de la proteína A/G agarosa:
• Proteína A/G: la proteína de fusión recombinante inmovilizada de los dominios de unión de anticuerpos de las proteínas A y G permite la purificación de la IgG policlonal de casi cualquier especie de mamífero.
• Resina de agarosa: el soporte es agarosa granulada al 6 % entrecruzada (CL-6B), la resina más utilizada en métodos de purificación de proteínas por afinidad.
• Inerte y estable: el excelente método de fabricación inmoviliza la proteína A/G mediante enlaces covalentes resistentes a la lixiviación y sin carga, lo que produce una unión no específica y posibilita que se use varias veces sin que afecte al rendimiento.
• Capacidad estándar: la proteína A/G agarosa Pierce tiene una carga densa de proteína A/G inmovilizada, lo que proporciona una capacidad de unión superior a 7 mg de IgG de humano por ml de resina.
Los cartuchos de cromatografía Pierce son compatibles con los principales sistemas automatizados de cromatografía líquida o para el procesamiento manual de jeringas, y se acoplan directamente a los sistemas ÄKTA™ o FPLC sin conectores adicionales. Con cada producto se incluye un paquete accesorio que se ajusta con facilidad a los cartuchos con racores de jeringa Luer-Lok o tubos de 0,0625 pulgadas. Los cartuchos de proteína A proporcionan separaciones cromatográficas rápidas, sencillas y reproducibles, y se pueden regenerar para múltiples usos.
La proteína A/G es una proteína diseñada genéticamente que combina los dominios de unión a IgG de las proteínas A y G. La proteína de fusión se expresa en E. coli La proteína A/G contiene cuatro dominios de unión de la Proteína A y dos de la Proteína G de la región Fc, lo que produce una masa final de 50.460 daltons (de 40 a 45 kDa por SDS-PAGE). La proteína A/G no es tan dependiente del pH como la proteína A sola; no obstante, tiene las propiedades aditivas de la proteína A y G.
La proteína A/G se une a todos los subtipos de IgG de humano, lo que la convierte en la opción idónea para purificar anticuerpos de IgG monoclonales y policlonales cuyo subtipo no se ha determinado. Además, se une a la IgA, la IgE, la IgM y (en menor medida) a la IgD. La proteína A/G también se une bien a todos los subtipos de IgG de ratón, pero no se une a la IgA, a la IgM o a la albúmina sérica de este animal. Por ello, la proteína A/G es una herramienta excelente para la purificación y detección de los anticuerpos monoclonales del ratón a partir de subtipos de IgG, sin que se produzcan interferencias de la IgA, la IgM y la albúmina sérica murina. Es posible que los subtipos individuales de anticuerpos monoclonales de ratón tengan una mayor afinidad con la proteína A/G quimérica que con las proteínas A o G.
La proteína A/G agarosa Pierce se prepara con el procedimiento químico de acoplamiento Thermo Scientific AminoLink, que ofrece varias ventajas en comparación con los métodos tradicionales de inmovilización del ligando. La inmovilización AminoLink da como resultado la conjugación entre los monómeros de azúcar de los gránulos de agarosa y los restos de lisina nativa de la proteína A mediante enlaces amida simples. A diferencia de la inmovilización habitual con bromuro de cianógeno (CNBr), el método AminoLink, que no introduce ningún grupo químico nuevo que pudiera causar uniones inespecíficas no deseadas, produce una unión estable y fundamentalmente irreversible. De esta forma, se obtiene una resina de gran capacidad de unión que mantiene la proteína A/G inmovilizada funcional después de varias series de purificación de anticuerpos.
La proteína A/G agarosa Pierce se une a casi todos los isotipos y a casi todas las IgG de mamíferos procedentes de muestras de suero, líquido ascítico, sobrenadante de cultivo celular y otras muestras de anticuerpos
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.