El kit de purificación de cobalto Thermo Scientific HisPur contiene columnas de centrifugación HisPur de 1 ml, tampones y tubos de recogida para la purificación de proteínas etiquetadas con polihistidina. La resina de cobalto HisPur de estas columnas es una resina de agarosa tetradentato quelante cargada con cobalto divalente (Co
2+) que permite obtener proteínas etiquetadas con His de alta pureza sin contaminación por metales.
Características de la resina de cobalto HisPur:
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Gran pureza: obtenga más de 10 miligramos de proteína pura etiquetada con His por mililitro de resina sin optimizar las condiciones de lavado de imidazol.
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Especificidad: el núcleo de coordinación cobalto-quelato une menos contaminantes de la proteína huésped, lo que da como resultado un ruido de fondo más bajo que el de las resinas de níquel.
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Baja lixiviación de metales: sin contaminación de metales en la muestra de proteínas etiquetadas con histidina eluida.
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Versatilidad: purifica las proteínas en condiciones nativas o desnaturalizantes. Es compatible con reactivos de lisis celular y con una gran variedad de aditivos de tampón.
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Rentable: la resina se puede reutilizar varias veces o desechar después de un solo uso.
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Flexibilidad: disponible como resina a granel, en kits, en columnas predispensadas, cartuchos de cromatografía y placas filtrantes de 96 pocillos.
En comparación con las resinas de quelato Ni-IDA y Ni
2+ de tetradentato, la resina de cobalto HisPur une proteínas etiquetadas con histidina con mayor especificidad (menos unión fuera del elemento diana) y las libera con condiciones más respetuosas (concentraciones más bajas de imidazol). Aunque las resinas de quelato Ni(
2+) consiguen un elevado rendimiento de proteínas, se unen de forma algo indiscriminada, por lo que el grado de pureza no es óptimo. Es frecuente que requieran pasos de limpieza adicional. Por el contrario, el cobalto maximiza la pureza de las proteínas sin sacrificar el resultado. La resina de cobalto HisPur une menos proteínas no específicas, muestra menos lixiviación de metales y admite condiciones de elución menos estrictas que las resinas de níquel.
La resina IMAC de cobalto HisPur une específicamente proteínas recombinantes etiquetadas con His que se pueden recuperar de manera eficaz mediante una elución suave de imidazol. Se pueden unir más de 10 mg de proteínas etiquetadas con His por mililitro de resina mediante una proteína de fusión de 28 kDa expresada y purificada a partir de un lisado de
E. coli.
Se pueden recuperar varias proteínas etiquetadas con His con una pureza similar o superior a la que se obtiene de otras resinas disponibles de IMAC de níquel o cobalto en formato de columna de centrifugación o de flujo por gravedad. El rendimiento de purificación de esta resina de cobalto HisPur se ha verificado con respecto a las resinas IMAC de otros proveedores y numerosas proteínas marcadas con His de distintos tamaños y niveles de expresión. Según los resultados obtenidos, la resina de cobalto HisPur consigue proteínas de máxima pureza sin que esto afecte a su rendimiento.
Formatos disponibles:•
Pulpas de resina: agarosa granulada al 6 % entrecruzada; frascos de 10 ml, 100 ml, 500 ml
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Columnas de centrifugación: columnas de 0,2 ml (microcentrífuga), 1 ml y 3 ml
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Kits de purificación: kits completos en los tres tamaños de columna
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Cartuchos de cromatografía:obtenga más información y consulte los datos de los cartuchos de cromatografía HisPur•
Placas de centrifugación de 96 pocillos
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