Invitrogen™

Sistema de expresión ViraPower™ HiPerform™ T-REx™ Gateway™

Número de catálogo: A11141
Invitrogen™

Sistema de expresión ViraPower™ HiPerform™ T-REx™ Gateway™

Número de catálogo: A11141
Número de catálogo
A11141
Tamaño de la unidad
20 reactions
Precio (USD)
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Descripción general del producto
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Citas y referencias
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Recomendaciones
El sistema de expresión ViraPower™ HiPerform™ T-Rex™ Gateway™ incluye todos los componentes necesarios para generar lentejas, incluyendo el kit vectorial, la línea celular 293FT y el kit de soporte. Este kit combina las tecnologías lentiviral ViraPower™ HiPerform™, T-Rex™ y Gateway™ de Invitrogen para facilitar la clonación a base de recombinación sencilla y la expresión de alto nivel a base de lentiviral, regulada (tetraciclina inducible), de un gen objetivo en células de mamíferos divisorias y no divisorias. El vector pLenti6.3⁄ TO⁄ V5-DEST está equipado con dos elementos genéticos clave, lo que lo convierte en un vector HiPerform™: el elemento regulador postranscripcional Woodchuck (WPRE) y la secuencia central de la Polypurine Tract (cPPT) del gen de la integrasa VIH-1 producen al menos 4 veces más en la expresión de proteínas que los vectores que carecen de estos elementos.

Ventajas
• Genera lentivirus incompetente para la replicación para la transducción de células de mamíferos divisorias y no divisorias
• Fácil recombinación basada en la™ tecnología Gateway
• Expresión estable, a largo plazo, regulada por tetraciclina
• Expresión de proteínas mejorada, hasta 4 veces o más, en comparación con los sistemas tradicionales de expresión viral

Características principales
• WPRE (elemento regulatorio postranscripcional Woodchuck) del virus de la hepatitis woodchuck, aumenta la expresión transgénica y el cPPT (tracto polipurino central) del gen de la integrasa VIH-1, aumenta el número de copias del lentivirus que se integra en el genoma del huésped, aumentando así el título viral. Juntos, el WPRE y cPPT hacen que la expresión de proteínas en la mayoría de los tipos de células sea cuatro veces mayor en comparación con otros vectores que no contienen estos elementos.
• Promotor híbrido que consiste en el promotor del citomegalovirus humano (CMV) y dos sitios de operador de tetraciclina 2 (TetO2) para la expresión regulada de alto nivel del marcador de
• Selección de blasticidina del gen objetivo para la selección estable bajo control del promotor SV40

El kit incluye
• Kit de vectores ViraPower™ HiPerform™ T-Rex™ Gateway™ (N.º de cat.: A11144)
• Kit de soporte lentiviral ViraPower™ BSD (N.º de cat.: K497000)
• Línea celular 293FT (N.º de cat.: R70007)
• Mezca de encimas Gateway™ LR Clonase™ II Plus (N.º de cat.: 12538120)
• E. coli One Shot™ Stbl3™ químicamente competente (N.º de cat.: C737303)
• Geneticina™ (N.º de cat.: 10131035)
• Plásmido de control positivo pENTR™ Gus

Para uso en investigación solamente. No diseñado para uso diagnóstico o terapéutico.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.

Especificaciones

Resistencia bacteriana a los antibióticos
Ampicilina (AMPR), blasticidina (BsdR)
Método de clonación
Gateway™
Sistema constitutivo o inducible
Inducible
Tipo de entrega
Lentiviral
Tipo de célula
293-FT
Formato
Kit
Promotor
CMV/TO
Vector
pLenti
Enzima de la pasarela
LR Clonase™ II Plus, LR Clonase™ II
Para utilizar con (equipo)
Gateway™, HiPerform™, T-REx™, ViraPower™
Para utilizar con (aplicación)
Expresión de proteínas
Agente inductor
Doxiciclina, tetraciclina
de control principal
Expresión viral
N.º de reacciones
20 Reactions
Enzima de PCR
Polimerasa de corrección
Línea de productos
Gateway™, HiPerform™, T-REx™, ViraPower™
Tipo de producto
Sistema de expresión
Etiqueta de proteína
Marcador epítopo V5
Agente de selección (eucariótico)
Blasticidina
Origen de replicación
Origen de pUC
Marcador de selección eucariota
BsdR
Promotor del marcador de selección
Promotor de PGK
Elementos especiales
WPRE, cPPT

Contenido y almacenamiento

Contenido

El sistema de expresión The ViraPower™ HiPerform™ T-Rex™ Gateway™ incluye los siguientes componentes:
• Kit de vectores ViraPower™ HiPerform™ T-Rex™ Gateway™ (N.º de cat.: A11144) que incluye:
  • 6 ug del vector pLenti6.3⁄TO⁄V5-DEST (40 µl de vector a 150 ng⁄µl en el tampón TE, pH 8,0)
  • 20 ug devector TR pLenti3.3⁄ (40 µl de vector a 0,5 µg⁄µl en tampón TE, pH 8,0)
  • 10 ug de plásmido pLenti6.3⁄TO⁄V5-GW⁄lacZ (20 µl de plásmido a 0,5 µg⁄µl en el tampón TE, pH 8,0)
  • 1 ml de tetraciclina (10 mg⁄ml en agua)

  • • Kit de soporte Bsd lentiviral ViraPower™ (n.º de cat. K497000), que incluye:
  • 195 ug de la mezcla de envase para lentiviral ViraPower™ (contiene 195 uL de una mezcla deplásmidos pLP1, pLP2 y pLP⁄ VSVG, a 1 ug⁄uL en el tampón TE, pH 8,0)
  • 0,75 ml de Lipofectamine™ 2000 (N.º de cat.: 11668027)
  • 50 mg de polvo de blasticidina (N.º de cat.: R21001)

  • • Línea celular 293FT (N.º de cat.: R70007): 1 vial que contiene 3 x 106 células congeladas en 1 ml de medio de congelación.
    • Mezcla de enzimas Gateway™ LR Clonase™ II Plus (n.º de cat. 12538120): 40 uL de mezcla de encimas Gateway™ LR Clonase™ II Plus y 40 uL de solución de proteinasa K a una concentración de 2 ug⁄ml.
    • E. coli químicamente competente One Shot™ Stbl3™ (n.º de cat.: C737303): 21 X 50 uL de células Stbl3™, 6 ml de S.O.C. Medio y 50 uL de ADN de control pUC19 (10 pg⁄uL).
    • Geneticin™ (N.º de cat.: 10131035): 20 ml de solución de Geneticin™ (50 mg⁄ml).
    • Plasma de control positivo pENTR™ Gus

    Almacenamiento

    • Vectores: -20 °C
    • Mezcla de envasado ViraPower™: -20 °C
    • Mezcla de enzimas LR Clonase™ II: -20 °C para almacenamiento de hasta 6 meses, -80 °C para almacenamiento a largo plazo
    • Tetraciclina: -20 °C (protegido de la luz)
    • Basticidina: -20 °C
    • Geneticina: 4 °C o -20 °C
    • Lipofectamine™ 2000: 4 °C (no congelar)
    • E. coli químicamente competente OneShot™ Stbl3™: -80 °C
    • Células 293 FT: Nitrógeno líquido
    • Control positivo pENTR™ Gus: -20 °C

    Figuras

    Documentos y descargas

    Certificados

      Preguntas frecuentes

      Citas y referencias

      Search citations by name, author, journal title or abstract text