El vector pcDNA™ 3.4 TOPO™ es un vector de expresión constitutiva de mamíferos diseñado para ofrecer niveles excepcionalmente altos de expresión transgénica. Puede usarse en células adaptadas a la suspensión, como Expi293F™, FreeStyle™ 293-F y FreeStyle™ CHO-S, para una expresión de proteínas transitorias. El vector se puede utilizar también como un plásmido de expresión seleccionable de Geneticin™ para la ingeniería de líneas celulares estables. El promotor mejorado con CMV de longitud completa y otros elementos de expresión suelen permitir mayores niveles de expresión que las construcciones de expresión basadas en pcDNA™ 3.1, 3.2 y 3.3.

El vector pcDNA 3.4 TOPO™ contiene los siguientes elementos:

• La longitud total de promotor/potenciador inmediato-precoz del citomegalovirus humano (CMV) para una expresión génica de alto nivel en una gran variedad de células de mamíferos
• WPRE (elemento regulador postranscripcional Woodchuck) secuencia abajo del sitio de clonación para mejorar la expresión del transcrito
• Sitio de clonación TOPO™ para una clonación rápida y eficaz (> 85 %) de productos PCR amplificados con Taq
• Gen de resistencia a la neomicina para la selección de líneas celulares estables con Geneticin™
• Origen pUC para una alta replicación de copias y el mantenimiento de plásmido en E. coli

El kit de pcDNA3.4™ TOPO™ TA Cloning incluye un vector de plásmido adaptado a TOPO™, reactivos para clonación de PCR del gen seleccionado en el vector, un primer de secuenciación para la confirmación de la orientación de los insertos, así como células competentes One Shot™ TOP10.