El suplemento CultureOne es un suplemento con definición química, sin suero diseñado para mejorar significativamente la diferenciación entre las células madre neuronales (NSC) y las neuronas. En comparación con los métodos convencionales de diferenciación en los que las NSC pueden crecer en exceso y volverse onerosas, el suplemento CultureOne elimina más del 75 % de las células progenitoras neuronales contaminantes con una muerte celular mínima y sin efecto en otras vías mediadas por quinasa. Los mejores cultivos resultantes de células neuronales diferenciadas y distribuidas uniformemente permiten mejorar los ensayos posteriores, acelerar la maduración neuronal y mantenerlas sin fisuras durante 5 semanas o más.
Cada vial de suplemento CultureOne contiene un reactivo líquido 100X de 5 ml que puede añadirse fácilmente a cualquier medio convencional de diferenciación neuronal, como
el medio neurobasal con
suplementos B-27. Después de dos semanas de diferenciación con el suplemento CultureOne, este se puede eliminar y los cultivos resultantes contendrán considerablemente menos células progenitoras durante 5 semanas o más.
Ensayos posteriores mejoradosEl análisis de neuronas derivadas de NSC puede ser difícil debido a la presencia de células progenitoras de crecimiento excesivo en el cultivo. Estas células invasivas pueden hacer que los experimentos de adquisición de imágenes y electrofisiología sean un desafío y poner en duda la relevancia fisiológica de los ensayos de expresión génica. El suplemento CultureOne reduce la proliferación de células progenitoras, proporcionando una población de células neuronales más limpia y relevante, lo que mejora significativamente la experiencia y el resultado del ensayo.
Maduración acelerada de neuronas diferenciadasCon el suplemento CultureOne, las neuronas derivadas de NSC expresan marcadores fisiológicos maduros más rápido y desarrollan neuritas más largas que con los cultivos neuronales derivados de NSC sin tratar. Las neuronas tratadas con el suplemento CultureOne también expresan un número significativamente mayor de canales de iones de calcio sincronizados con voltaje, que son un marcador importante de la madurez y excitabilidad neuronales.
Cultivo más prolongado de neuronas derivadas de NSCPara experimentos que requieren que las neuronas derivadas de NSC maduren durante largos periodos de tiempo, el suplemento CultureOne permite el mantenimiento de neuronas enriquecidas y diferenciadas durante 5 semanas o más de manera eficiente. En cambio, los métodos convencionales de diferenciación resultan en la proliferación de células progenitoras neuronales, que tienden a agruparse y hacen que el cultivo se desprenda de la placa.
Para los protocolos establecidos que usan el suplemento CulturaOne, consulte nuestro
manual de protocolos de neurología Gibco.
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