Conjugados de anexina V para la detección de apoptosis

Name: Conjugados de anexina V para la detección de apoptosis
SKU: A35110

Detecte las primeras etapas de la apoptosis con la anexina V independiente Alexa Fluor, APC, Pacific Blue, PE, FITC y conjugados de biotina mediante citometría de flujo.

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Número de catálogo	Excitación/emisión	Líneas láser del citómetro de flujo	Conjugado
A35110	650/660	633-637	APC (Aloficocianina)
A13201	495/519	488	Alexa Fluor 488
A13199	494/518	488	FITC
A13202	578/603	532, 561	Alexa Fluor 568
A23204	650/665	633-637	Alexa Fluor 647
A35108	555/565	532, 561	Alexa Fluor 555
A35109	679/702	633-637	Alexa Fluor 680
A35111	565/578	488, 532, 561	PE
A35122	410/455	405	Pacific Blue

9 opciones

Número de catálogo A35110

Precio (USD)

Excitación/emisión:

650/660

Líneas láser del citómetro de flujo:

633-637

Conjugado:

APC (Aloficocianina)

Consiga una detección rápida y fiable de la apoptosis celular temprana con conjugados independientes de anexina V para la detección de apoptosis. Los conjugados de anexina V ofrecen una diferencia de hasta 100 veces en la intensidad de la señal de fluorescencia entre células apoptóticas y no apoptóticas mediante citometría de flujo.

La anexina V tiene una alta afinidad a la fosfatidilserina (PS), que se expone en el recubrimiento externo de las células que experimentan apoptosis. Debido a esta afinidad, los reactivos de anexina V etiquetados fluorescentemente se utilizan comúnmente en la investigación de la apoptosis.

Los conjugados de anexina V proporcionan métodos de detección rápidos y fiables para estudiar la externalización de la fosfatidilserina, un indicador de las etapas intermedias de la apoptosis. La diferencia en la intensidad de la fluorescencia entre las células apoptóticas y no apoptóticas teñidas con nuestros conjugados de anexina V fluorescente, medida por citometría de flujo, suele ser de aproximadamente 100 veces.

En colaboración con Nexins Research BV, proporcionamos los mejores y más brillantes conjugados de anexina V disponibles, incluidos los conjugados de anexina V Alexa Fluor 350, 488, 555, 568, 594, 647 y 680, así como los conjugados de anexina V APC, biotina-X, FITC, Pacific Blue y PE. Los conjugados de anexina V altamente fluorescente proporcionan métodos de detección rápidos y fiables para el estudio de la externalización de la fosfatidilserina, uno de los primeros indicadores de apoptosis.

El conjugado de anexina V Pacific Blue es excitable con violeta, lo que lo hace ideal para instrumentos con un láser violeta y para experimentos multicolor que incluyan colorantes verdes o rojos fluorescentes.

Los beneficios de nuestros conjugados de anexina V incluyen:
• Conjugado con los colorantes Invitrogen Alexa Fluor y eFluor para señales más brillantes
• Conjugado para todos los láseres disponibles
• Disponible como reactivos independientes o kits fáciles de usar

La tinción de anexina V para detectar células apoptóticas solo se puede realizar en células y tejidos vivos. Si las muestras se van a fijar después de la tinción, se requieren condiciones específicas para lograr la retención transitoria de la señal. Estas incluyen el uso de un método de fijación a base de aldehídos sin alcohol, el uso de tampones que contengan Ca2+ y evitar los tensioactivos/detergentes. Para su comodidad, también ofrecemos un tampón concentrado de unión a anexina que facilita la unión de la anexina V a la fosfatidilserina en ensayos de apoptosis.

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.

Especificaciones

ColorRojo

DescripciónConjugado de anexina V, APC (anexina V APC) (sustituye al producto anexina V05)

Excitación/emisión650/660

Líneas láser del citómetro de flujo633-637

Para utilizar con (equipo)Citómetro de flujo

Contenido del kitContiene 1 vial de conjugado de anexina V, APC.

N.º de reacciones50

Tipo de productoConjugado de anexina V

Cantidad250 μL

Condiciones de envíoHielo húmedo

ConjugadoAPC (Aloficocianina)

Unit SizeEach

Contenido y almacenamiento

Almacenar en el refrigerador (2 °C a 8 °C) y proteger de la luz.

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Preguntas frecuentes

I trypsinized my adherent cells and labeled with annexin V, and now my flow data is showing a high percentage of apoptotic cells even for control, untreated cells. What is the problem?

Trypsinization or mechanical scraping of cells temporarily disrupts the plasma membrane, allowing annexin V to bind phosphatidylserine on the cytoplasmic surface of the cell membrane and thus leading to false positive staining. Allow the cells to recover for about 30 minutes in optimal cell culture conditions and medium after trypsinizing/scraping so that they can recover their membrane integrity before staining. For lightly adherent cell lines, such as HeLa and NIH 3T3, another option is to use non-enzyme treatments like Gibco Cell Dissociation Buffer (Cat. No. 13151014).

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Can I detect annexin V staining in an imaging assay?

Annexin V staining is not typically used in imaging experiments; it is a better reagent for flow cytometry analysis. All cells will stain to some extent, so it can be difficult to distinguish a relatively bright annexin V-stained cell from a dimmer non-apoptotic cell. Caspase activation, detected using our CellEvent Caspase 3/7 or Image-iT LIVE Caspase detection kits, is a better method for detecting apoptosis in an imaging assay.

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When should I stain adherent cells with annexin V for flow cytometric analysis? Before or after I trypsinize them?

Trypsinize first and then allow the cells to recover about 30 minutes in optimal cell culture conditions and medium before staining with annexin V conjugates. Trypsinization or mechanical scraping of cells temporarily disrupts the plasma membrane, allowing for annexin V to bind phosphatidylserine on the cytoplasmic surface of the cell membrane and thus leading to false positive staining. For lightly adherent cell lines such as HeLa and NIH 3T3, you could use a less harsh (non-enzymatic) dissociation product like Gibco Cell Dissociation Buffer (Cat. No. 13151014).

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Can I fix my cells after annexin V labeling?

Annexin V staining is best analyzed on live cells. If you need to fix your cells for analysis, then fix in 3.7% formaldehyde in PBS containing calcium and magnesium to maintain binding during fixation. The signal will not be retained after permeabilization, thus annexin V staining is not compatible with internal antibody labeling.

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I am trying to label adherent cells with annexin V and am finding that everything is getting labeled. How can I fix this?

Treating cells with trypsin or other reagents to detach adherent cells causes damage to the membrane, such that cells will be labeled with annexin V. The best way to avoid this problem is to allow your cells to recover for 30-45 min in the incubator. Swirl the tube/plate/flask every few minutes to prevent re-attachment. After this recovery period, you can label your cells with annexin V and analyze by flow cytometry.

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