Haemophilus y Bordetella  son pequeños bacilos gramnegativos que tienden a asumir una forma cocobacilar. Los miembros de ambos géneros contienen especies que se encuentran exclusivamente en humanos y causan infecciones de las vías respiratorias. Las principales especies son Haemophilus influenzae, la causa de la meningitis purulenta aguda, y Bordetella pertussis, la causa de la tos ferina.

El agar de carbón fue desarrollado por Oxoid para proporcionar un medio que no contiene sangre para el cultivo de Bordetella pertussis y Haemophilus influenzae. Proom¹ demostró que el ácido nicotínico era un factor de crecimiento esencial para las bordetellas. Ensminger et al.² utilizaron un medio de carbón para el crecimiento de Bordetella pertussis en la producción de vacunas y encontraron que el medio podría reemplazar a Bordet-Genou. Mishulow et al.³ utilizaron agar de carbón para el cultivo de Bordetella pertussis .

La Haemophilus influenzae se cultiva en el medio que contiene 10 % de sangre achocolatada, pero sin antibióticos. La placa inoculada se incuba de 2 a 3 días a 37 °C. Las colonias suelen ser pequeñas, transparentes y similares a las gotas, pero puede producirse alguna transformación en la colonia de tipo ‘rugoso’. La diferenciación de especies se realiza mediante el examen de la necesidad de factores de crecimiento X y V en la base de agar de sangre CM0055.
El mayor problema en el aislamiento de las especies de  Bordetella  de las secreciones naso-faríngeas es la supresión de la flora no deseada durante el largo periodo de incubación en medios muy nutritivos.

La primera demostración in vitro  de Flemming de la penicilina fue para probar que podría ayudar a aislar la  Bordetella pertussi en medios⁴. Lacey⁵ confirmó esto, pero descubrió que la flora resistente a la penicilina todavía causaba problemas. Complementó la penicilina con 2 µg/ml de dihidrocloruro de 4,4’diamidino-difenilamina (M y B 938), lo que aumentó la selectividad de este medio.

Broome et al.⁶ encontraron que la meticilina era superior a la penicilina al suprimir la flora naso-faríngea no deseada, pero la publicación anterior de Sutcliffe y Abbott⁷ en la que se demostró que la cefalexina (40 µg/ml) era superior a la penicilina, ha demostrado ser el avance más significativo.

Se han confirmado los beneficios de la cefalexina como agente selectivo de  Bordetella pertussis ^8,9,10,11. La capacidad de recuperar células tensionadas y la vida útil mucho más larga (6-8 semanas) son beneficios adicionales a su superioridad al suprimir el crecimiento naso- faríngeo no deseado.