Thermo Scientific DNase I, RNase-free es una endonucleasa que digiere el ADN monocatenario y bicatenario. Hidroliza enlaces fosfodiéster produciendo mono y oligodesoxirribonucleótidos con grupos 5'-fosfato y 3'-OH..
La actividad enzimática depende estrictamente del Ca2+ y se activa mediante los iones Mg2+ o Mn2+.

En presencia de Mg2+, DNase I fragmenta cada cadena de ADN bicatenario
de forma independiente, de manera estadísticamente aleatoria. En presencia de Mn2+, la enzima fragmenta las dos cadenas de ADN y aproximadamente en el mismo sitio, lo que produce fragmentos de ADN con extremos romos o con extremos protuberantes de tan solo uno o dos nucleótidos.

Características destacas

• Enzima recombinante
• Purificada a partir de huésped no animal con una concentración intrínseca inferior de ARNasas

Aplicaciones

• Preparación de ARN libre de ADN
• Extracción de ADN de la muestra después de la transcripción in vitro
• Preparación de ARN libre de ADN antes de RT-PCR y RT-qPCR
• Etiquetado de ADN mediante traslación por muestras junto con DNA Polymerase I
• Estudios de interacciones ADN-proteína mediante huella de ADNasa I libre de ARNasa
• Generación de una biblioteca de insertos de ADN superpuestos aleatoriamente. Se utiliza tampón de reacción que contiene Mn2+

Nota

La ADNasa I es sensible a la desnaturalización física. Mezcle suavemente invirtiendo el tubo. No agite.