5'

↓

N7

G

A

A

C

N6

T

C

C

N12-13

↓

3'

3'

↑

N12-13

C

T

T

G

N6

A

G

G

N7

↑

5'

La enzima de restricción AloI Thermo Scientific reconoce los sitios ^(7/12-13)GAAC(N)6TCC(12-13/7)^ y se corta mejor a 30 °C en tampón R. Consulte Reaction Conditions for Restriction Enzymes (Condiciones de reacción para enzimas de restricción) para ver una tabla de actividad enzimática, condiciones para digestiones dobles e inactivación por calor para esta y otras enzimas de restricción.

Las endonucleasas de restricción convencionales Thermo Scientific representan una gran colección de enzimas de restricción de alta calidad, optimizadas para funcionar en uno de los tampones del sistema de cinco tampones. Además, se proporciona el tampón universal Tango para mayor comodidad en digestiones dobles. Todas las enzimas muestran una actividad del 100 % en las condiciones de reacción y tampón recomendadas. Para garantizar uniformidad en el rendimiento, los tampones de enzimas de restricción Thermo Scientific contienen BSA previamente mezclada, lo que mejora la estabilidad de numerosas enzimas y fija sustancias contaminantes que pueden estar presentes en preparaciones de ADN.

Características

• Calidad superior: control de calidad riguroso y proceso de fabricación líder en el sector
• Cómodo sistema de cinco tampones codificados por colores
• Incluye tampón Tango universal para digestiones dobles
• BSA premezclada en tampones de reacción
• Amplia selección de especificidades de endonucleasas de restricción

Aplicaciones

• Clonación molecular
• Mapas de sitios de restricción
• Genotipificación
• Southern blotting
• Polimorfismo en la longitud de fragmentos de restricción (RFLP)
• SNP

Nota: Para conocer la sensibilidad de metilación, consulte las especificaciones del producto. Con la incubación a 37 °C se obtiene una actividad del 20%. AloI produce cortes bicatenarios en ambos lados del punto de reconocimiento interrumpido. Su única característica es un punto de fragmentación degenerada en el lado 3 de la secuencia de reconocimiento (a 12 o 13 nt de distancia). La presencia de SAM en la mezcla de reacción produce una fragmentación incompleta con AloI. Una sobredigestión con 10 veces la cantidad recomendada de AloI puede provocar una actividad estrella (star activity). Alol puede permanecer asociada al ADN fragmentado. lo que puede provocar un desplazamiento de las bandas de ADN durante la electroforesis. Para evitar patrones atípicos de las bandas de ADN, use 6X DNA Loading Dye & SDS Solution para la preparación de muestras o caliente el ADN digerido en presencia de SDS antes de la electroforesis.