Hay dos tampones optimizados disponibles para las polimerasas de ADN de alta fidelidad Thermo Scientific Phusion:
• Tampón HF 5X Phusion (F-518L, F-538L [verde Phusion], F-520L [sin detergente])
• Tampón GC 5X Phusion (F-519L, F-539L [verde Phusion], F-521L [sin detergente])
La tasa de errores de ADN polimerasa Phusion en el tampón HF (4,4 × 10
-7) es menor que la que presenta en el tampón GC (9,5 × 10
-7). Por lo tanto, el tampón HF se debe usar como tampón predeterminado para la amplificación de alta calidad. Sin embargo, el tampón GC puede mejorar el rendimiento de la ADN polimerasa Phusion en algunas plantillas difíciles o largas, como plantillas ricas en GC o aquellas con estructuras secundarias complejas. Para aplicaciones como microarray o DHPLC, donde los moldes de ADN necesitan estar libres de detergentes, recomendamos el uso de tampones de reacción sin detergente.
Los tampones verdes 5X Phusion incluyen un reactivo de densidad y dos colorantes de seguimiento para la carga directa de productos de PCR en un gel. Los tampones de color no interfieren con el rendimiento enzimático y son compatibles con aplicaciones posteriores, como la secuenciación del ADN, la unión y la digestión de restricción.
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