El kit de mutagénesis de sitio dirigido Thermo Scientific Phusion es una herramienta versátil y eficaz para introducir mutaciones puntuales, inserciones o deleciones en cualquier tipo de ADN plasmídico. Con este kit, el plásmido entero se amplifica usando primers fosforilados que introducen los cambios deseados. El producto de PCR lineal amplificado, que contiene la mutación deseada, está circularizado en una reacción de unión de 5 minutos con ligasa de ADN T4. El plásmido resultante se puede transformar en cualquier célula competente de E. coli.

La temperatura óptima de recocido para las ADN polimerasas Phusion puede diferir significativamente de la de las polimerasas basadas en Taq.

Para obtener unos resultados óptimos, comience por calcular con precisión su Tm con nuestra calculadora de TM.


Aspectos destacados

• Método de amplificación exponencial robusto y fiable
• Sin requisitos, como vectores especiales, sitios de restricción o estado de metilación para el plásmido objetivo
• No es necesario destruir el molde de inicio en un paso separado
• La ADN polimerasa de alta fidelidad Phusion Hot Start II minimiza las mutaciones secundarias no deseadas
• Amplificación de plásmidos grandes de hasta 10 kb
• La modificación de inicio en caliente de la polimerasa previene la amplificación de productos no específicos y la degradación no deseada de los cebadores antes del primer ciclo de PCR
• El kit incluye ligasa de ADN T4; no hay pasos de purificación antes o después de la unión
• Compatible con todas las cepas de células competentes de E. coli