La mezcla maestra de PCR Thermo Scientific Phusion U Green Multiplex es una mezcla maestra de PCR de punto final 2X lista para su uso y diseñada para la amplificación simultánea de múltiples objetivos en un solo tubo. Se pueden combinar más de 20 pares de cebadores en una sola reacción para una multiplexación altamente específica y eficiente en una amplia gama de concentraciones de cebadores y moldes.

La mezcla maestra para PCR Phusion U Green Multiplex contiene un tampón exclusivo con concentraciones equilibradas de todos los componentes de la PCR que eliminan la necesidad de la tediosa optimización. El formato Green simplifica aún más el flujo de trabajo: incluye un reactivo de densidad y dos colorantes de seguimiento de electroforesis para la carga directa de productos de PCR en geles.

Aspectos destacados

• PCR multiplex específica y eficiente de más de 20 objetivos de hasta 2,5 kb
• Excelentes resultados con moldes de pureza subóptima debido a la tolerancia a los inhibidores
• Ciclos rápidos y carga directa de productos de PCR en geles

Aplicaciones

• Identificación de genotipos
• Detección de patógenos
• Pruebas alimentarias
• Análisis de organismos genéticamente modificados
• Amplificación de microsatélites

La mezcla maestra se basa en ADN polimerasa Phusion U Hot Start, una enzima de alto rendimiento desarrollada con tecnología de fusión. De manera similar a otras enzimas de la familia Phusion, la ADN polimerasa Phusion U incorpora más nucleótidos por evento de unión que cualquier otra ADN polimerasa. Esto permite lograr una alta producción de productos de PCR con tiempos de extensión más cortos y, por consiguiente, tiempos totales de protocolo reducidos. La mejora significativa de la capacidad de procesamiento también permite una PCR multiplex satisfactoria en objetivos difíciles como plantillas con gran cantidad de GC o plantillas de pureza subóptima. Al ser altamente tolerante con muchos inhibidores de la PCR, las mezclasmaestras para PCR Phusion U Multiplex se pueden usar incluso con muestras no purificadas, como sangre o suero.

La especificidad de la PCR de multiplexación aumenta mediante el mecanismo de inicio en caliente mediado por Affibody. El ligando Affibody unido de forma reversible inhibe la polimerasa a temperatura ambiente, lo que evita la amplificación de productos inespecíficos y la formación de dímeros del cebador.

Uso de las ADN polimerasas Phusion
Las reglas de recocido para las ADN polimerasas Phusion son diferentes de las de muchas ADN polimerasas comunes (como las ADN polimerasas Taq). Para obtener resultados óptimos, utilice nuestra calculadora de Tm en www.thermofisher.com/tmcalculator.