Las ADN polimerasas de alta fidelidad Thermo Scientific Phusion establecen un nuevo referente para PCR de alto rendimiento. Con una tasa de errores 50 veces menor que la de Taq y 6 veces inferior a la de Pfu, las polimerasas de ADN de alta fidelidad Phusion son una opción excelente para la clonación y otras aplicaciones que requieren alta fidelidad. Las ADN polimerasas Phusion ofrecen un rendimiento sólido con tiempos de protocolo cortos, incluso en presencia de inhibidores de PCR y generan una producción más alta con cantidades de enzimas más bajas que otras ADN polimerasas.

Aspectos destacados

• Configuración de la reacción a temperatura ambiente
• No hay amplificación no específica ni degradación de cebadores durante la preparación de la reacción
• Reactivación en tiempo cero debido a la tecnología de inicio en caliente única
• Alta fidelidad (52X Taq)
• PCR rápida debido a tiempos de extensión cortos (15-30 s/kb)
• Reacciones robustas, optimización mínima necesaria
• Mayor producción con cantidades enzimáticas mínimas
• Carga directa en geles

Con ADN polimerasas de alta fidelidad Phusion Hot Start II debido a la combinación de ADN polimerasa Phusion y una unión reversible, el ligando Affibody específico que inhibe la actividad de la ADN polimerasa a temperatura ambiente. El ligando Affibody también inhibe la actividad de exonucleasa 3´→5´ de la polimerasa, lo que evita la degradación de los cebadores y del ADN del molde durante la preparación de la reacción. A temperaturas que potencian la actividad de la polimerasa, se libera el ligando, lo que activa completamente la polimerasa. La ADN polimerasa Phusion Hot Start II se reactiva inmediatamente a temperaturas elevadas por lo que no requiere un paso de activación diferente en protocolos de PCR.
La mezcla maestra de PCR de alta fidelidad Phusion Green Hot Start II es una práctica mezcla de 2X diseñada para minimizar el número de pasos de pipeteo. La mezcla maestra contiene la ADN polimerasa Phousion Hot Start II, nucleótidos y tampón de reacción optimizado, incluido el MgCl₂. El tampón también incluye un reactivo de densidad y dos colorantes de seguimiento para la carga directa de productos de PCR en un gel.

Aplicaciones

• PCR de alta fidelidad
•Gran capacidad de procesamiento
• Amplificación de alto rendimiento de moldes difíciles (ricos en GC)
• Generación de moldes para secuenciación
• PCR multiplex
• PCR de largo alcance
• Clonación
• Mutagénesis
• Micromatriz

Uso de ADN polimerasa Phusion
Las reglas de recocido para ADN polimerasa Phusion son diferentes a las de muchas ADN polimerasas comunes (como las ADN polimerasas Taq). Para obtener resultados óptimos, utilice nuestra calculadora de Tm en www.thermofisher.com/tmcalculator.