FastDigest CseI
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FastDigest CseI
Thermo Scientific™

FastDigest CseI

5' G A C G C N5↓ 3'3' C T G C G N10↑ 5'La enzima de restricción CseI ThermoMás información
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Número de catálogoCantidad
FD190420 μL (20 Reactions)
Número de catálogo FD1904
Precio (USD)
-
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Cantidad:
20 μL (20 Reactions)
Pedido a granel o personalizado
5'  G  A  C  G  C  N5↓ 3'
3'  C  T  G  C  G  N10↑ 5'

La enzima de restricción CseI Thermo Scientific FastDigest reconoce el sitio GACGC(5/10)^ y se corta mejor a 37 °C en un periodo de entre 5 y 15 minutos con el tampón FastDigest universal. Isoesquizómeros: HgaI.

Thermo Scientific FastDigest CseI pertenece a una línea avanzada de enzimas de restricción rápidas que presentan una actividad del 100 % en los tampones de reacción universales FastDigest y FastDigest Green.

El tampón universal permite la rápida digestión de ADN simple, doble o múltiple en un periodo de entre 5 y 15 minutos, por lo que no es necesario cambiar el tampón ni realizar pasos de limpieza de ADN posteriormente. Consulte Reaction Conditions for FastDigest Enzymes (Condiciones de reacción para enzimas FastDigest) para ver una tabla de actividad enzimática, inactivación por calor y tiempos de incubación para esta y otras enzimas de restricción FastDigest. Todas las enzimas de modificación del ADN, como el fragmento Klenow, la ligasa de ADN T4, las fosfatasas alcalinas y la ADN polimerasa T4, tienen una actividad del 100 % en el tampón FastDigest. Por lo tanto, las enzimas para aplicaciones posteriores se pueden añadir directamente a la mezcla de reacción FastDigest.

Para mayor comodidad, el tampón FastDigest Green incluye un reactivo de densidad y dos tintes de seguimiento para la carga directa de productos de reacción de digestión en geles.

Los breves tiempos de incubación y la composición óptima del tampón universal FastDigest eliminan los efectos de la actividad estrella.

Características

• Actividad del 100 % de todas las enzimas FastDigest en el tampón universal
• 100 % de compatibilidad del tampón con aplicaciones posteriores
• Digestión completa en un periodo de entre 5 y 15 minutos
• Carga directa en geles
• Sin actividad estrella
• 176 enzimas FastDigest disponibles

Aplicaciones

• Clonación molecular
• Mapas de sitios de restricción
• Genotipificación
• Southern Blot
• polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción (RFLP)
• Análisis de SNP

Nota: Si desea realizar una fragmentación con FastDigest CseI, necesitará al menos dos copias de su secuencia de reconocimiento. FastDigest CseI puede permanecer asociada al ADN fragmentado. lo que puede provocar un desplazamiento de las bandas de ADN durante la electroforesis. Para evitar patrones atípicos de las bandas de ADN use el colorante de carga 6X y la solución SDS (R1151) para la preparación de muestras o caliente el ADN digerido en presencia de SDS antes de la electroforesis.

El tampón FastDigest Green ofrece el mismo alto nivel de rendimiento en la digestión del ADN y las aplicaciones posteriores que el tampón FastDigest incoloro. Para aplicaciones que requieren análisis de producto por excitación de fluorescencia (por ejemplo, mediciones de concentración en luz UV), se recomienda el tampón FastDigest incoloro.

Para conocer la sensibilidad de metilación, consulte las especificaciones del producto.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Tampón compatibleTampón FastDigest/FastDigest Green 10X
Inactivation Temperature80°C
Sobrante5' protruding ends
Tipo de productoEnzima de restricción
Cantidad20 μL (20 Reactions)
EnzimaCseI
Sensibilidad a la metilaciónEs sensible a la metilación CpG, no es sensible a la metilación dam, no es sensible a la metilación dcm
Temperatura óptima de reacción37 °C
Línea de productosFastDigest
Categoría de investigaciónClonación sin cicatrices
Sensible a la inactivación del calorSí
RE de tipo IISSí
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
• FastDigest CseI (20 μL)
• 10X FastDigest Buffer (1.0 mL)
• 10X FastDigest Green Buffer (1.0 mL)

Store at –20°C.

Preguntas frecuentes

Can I store the FastDigest Buffers at 4 degrees C?

The FastDigest Buffers can be stored at 4 degrees C for at least 6 months. For long-term storage until their expiration, we recommend storing the FastDigest and FastDigest Green Buffers at -20 degrees C.

How can I perform large scale digestion with the FastDigest restriction enzymes?

Our general recommendation is to use 5-10 µL of FastDigest enzymes with 100 µg DNA in 500 µL and 10-20 µL of the FastDigest enzymes with 200 µg DNA in 1 mL. Incubate the reaction for 16 h (or the longest recommended incubation time if the particular enzyme is prone to star activity) at the recommended temperature. Optimal conditions may vary as complete digestion of DNA depends on the nature of the particular FastDigest restriction enzymes and the DNA substrates.

How I can transform or calculate reaction numbers in the unit of FastDigest enzymes?

The concentration of FastDigest enzymes is proprietary information. The FastDigest enzyme activity is measured by FastDigest unit (FDU): 1 µL of enzyme (1 FDU) cleaves 1 µg of DNA substrate in 5-15 min at 37 degrees C in 20 µL of 1X FastDigest buffer.

Are the FastDigest and FastDigest Green Buffer available separately?

Yes, the FastDigest Buffer (Cat. No. B64) and the FastDigest Green Buffer (Cat. No. B71) can be purchased separately.

What is the difference between FastDigest Buffer and FastDigest Green Buffer?

The FastDigest Green Buffer offers the same performance as the colorless FastDigest Buffer but enables direct loading of the reaction mixture on gels. The 10X FastDigest Green Buffer includes a density reagent and two tracking dyes for direct loading. The blue dye migrates with 3-5 kb DNA fragments in a 1% agarose gel and has an excitation peak of 424 nm. The yellow dye migrates faster than 10 bp DNA fragments in a 1% agarose gel and has an excitation peak of 615 nm.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Restriction Enzyme Cloning Support Center.

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