El modelo habilitador de GPCR Tango™ proporciona en un sistema sencillo los mismos reactivos que utiliza Invitrogen para fabricar la familia de líneas celulares de GPCR Tango™:

1. La línea celular parental Tango™ Arrestin2-UAS-bla U20S que tiene el gen indicador de la betalactamasa (bla) bajo el control de un elemento de respuesta UAS integrado de forma estable, así como la proteína de fusión de la proteasa arrestina beta⁄TEV expresada como constituyente.

2. El vector Tango™ pDest-Gal4VP16-M que se utiliza para la inserción de su GPCR de interés para la línea celular parental Tango™ arrestina2-UAS-bla U2OS.

Cuando el vector Tango™ pDest-Gal4VP16-M que contiene una GPCR de interés se integra en la línea celular parental, se expresa la proteína quimérica receptor-Gal4VP16. Tras la unión del ligando y la activación del receptor, la arrestina marcada con proteasa se recluta en el receptor. El elemento de respuesta UAS se escinde del GPCR y se transloca al núcleo e impulsa la expresión génica del indicador de betalactamasa. La activación del gen indicador proporciona una medición cuantificable del grado de interacción entre el receptor objetivo y la pareja de arrestina marcada con proteasa, y no se ve afectada por otras vías de señalización en la célula, proporcionando una lectura exquisitamente específica de la activación del receptor objetivo.

La tecnología de ensayo de GPCR Tango™ de Invitrogen combina los beneficios de la plataforma de ensayo Tango™ con el sistema indicador de betalactamasa de células vivas sensible y altamente preciso. La plataforma de ensayo Tango™ se basa en un ligando que se une a un receptor acoplado a proteína G (GPCR) que desencadena la desensibilización, un proceso mediado por el reclutamiento de proteínas de arrestina intracelular en el receptor activado. Como resultado, la activación de GPCR inducida por ligando se puede ensayar mediante el control de la interacción de la arrestina con el GPCR de prueba. Una ventaja importante de este enfoque es que no depende de la especificidad de señalización de la proteína G del receptor objetivo.

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