El kit Zero Blunt™ PCR Cloning ofrece un método sencillo para la clonación de alta eficacia (> 80 %) de productos de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) con extremo romo que se amplifica con ADN polimerasas de corrección termoestables. El kit de clonación Zero Blunt™ PCR Cloning usa el vector multifunción de clonación pCR™-Blunt y la ligasa de ADN T4 ExpressLink™ para generar un producto de ligadura en un paso de ligadura de quince minutos a temperatura ambiente.

Características del kit Zero Blunt™ Cloning™ con el vector pCR™-Blunt:
• Rápida y práctica: ligadura a temperatura ambiente en 5 minutos
• Eficaz: gen ccdB para unos resultados de selección positivos en > 80 % de clones con el inserto adecuado
• Flexible: elección de resistencia a kanamicina o Zeocin™ para selección flexible de antibióticos

El vector pCR™-Blunt proporciona:
• Sitios EcoR I que flanquean el sitio de inserción del producto de la PCR para una sencilla escisión de insertos
• Sitio de primer o promotor T7 para la transcripción y secuenciación de ARN in vitro
• Sitios de primer directo e inverso M13 para secuenciación o detección de PCR

Funcionamiento de Zero Blunt™PCR Cloning
El kit Zero Blunt™ PCR Cloning se ha diseñado para clonar fragmentos de PCR con extremo romo (o cualquier fragmento de ADN con extremo romo) con un bajo fondo de no recombinantes. El vector pCR™-Blunt contiene el letal gen E. coliccdB fusionado al extremo C del fragmento LacZα (Bernard et al., 1994). La ligadura de un fragmento de PCR con extremo romo altera la expresión de la fusión del gen lacZα-ccdB, lo que solo permite el crecimiento de recombinantes positivos durante la transformación. Las células que contienen un vector no recombinante mueren durante la siembra en la mezcla de transformación.

Configuraciones del kit
El kit Zero Blunt™ PCR Cloning se ofrece con una serie de configuraciones: con E. coli químicamente competente One Shot™ TOPO10 (K2700-20 y K2700-40) y sin células competentes (K2750-20 y K2750-40) en tamaños de kit de 20 y 40 reacciones.