El kit Zero Blunt™ PCR Cloning ofrece un método sencillo para la clonación de alta eficacia (> 80 %) de productos de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) con extremo romo que se amplifica con ADN polimerasas de corrección termoestables. El kit de clonación Zero Blunt™ PCR Cloning usa el vector multifunción de clonación pCR™-Blunt y la ligasa de ADN T4 ExpressLink™ para generar un producto de ligadura en un paso de ligadura de quince minutos a temperatura ambiente.
Características del kit Zero Blunt™ Cloning™ con el vector pCR™-Blunt: • Rápida y práctica: ligadura a temperatura ambiente en 5 minutos • Eficaz: gen ccdB para unos resultados de selección positivos en > 80 % de clones con el inserto adecuado • Flexible: elección de resistencia a kanamicina o Zeocin™ para selección flexible de antibióticos
El vector pCR™-Blunt proporciona: • Sitios EcoR I que flanquean el sitio de inserción del producto de la PCR para una sencilla escisión de insertos • Sitio de primer o promotor T7 para la transcripción y secuenciación de ARN in vitro • Sitios de primer directo e inverso M13 para secuenciación o detección de PCR
Funcionamiento de Zero Blunt™PCR Cloning El kit Zero Blunt™ PCR Cloning se ha diseñado para clonar fragmentos de PCR con extremo romo (o cualquier fragmento de ADN con extremo romo) con un bajo fondo de no recombinantes. El vector pCR™-Blunt contiene el letal gen E. coliccdB fusionado al extremo C del fragmento LacZα (Bernard et al., 1994). La ligadura de un fragmento de PCR con extremo romo altera la expresión de la fusión del gen lacZα-ccdB, lo que solo permite el crecimiento de recombinantes positivos durante la transformación. Las células que contienen un vector no recombinante mueren durante la siembra en la mezcla de transformación.
Configuraciones del kit El kit Zero Blunt™ PCR Cloning se ofrece con una serie de configuraciones: con E. coli químicamente competente One Shot™ TOPO10 (K2700-20 y K2700-40) y sin células competentes (K2750-20 y K2750-40) en tamaños de kit de 20 y 40 reacciones.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Especificaciones
Cepa bacteriana o de levadura
TOP10
Método de clonación
Blunt PCR
Formato
Kit
Línea de productos
Zero Blunt™
Tipo de producto
Kit de clonación de PCR
Promotor
T7
Cantidad
20 reacciones
Vector
Vectores de clonación de ADN romos
Unit Size
20 reactions
Contenido y almacenamiento
Los kits de clonación de PCR Zero Blunt™ contienen vector pCR™-Blunt linealizado, ligasa de ADN T4 ExpressLink™, tampón de ligasa de ADN T4 ExpressLink™ 5X, plantilla de control, dNTP, agua estéril y primers directos e inversos M13. Los kits de células competentes contienen E. coli químicamente competente One Shot™, medio SOC y un plásmido de control superhelicoidal.
Almacenar la E. coli One Shot™ a -80 °C. Almacene todos los demás componentes a - 20 °C. Se garantiza la estabilidad de todos los reactivos durante 6 meses si se almacenan correctamente.
Figuras
Documentos y descargas
Certificados
Buscar por número de lote o por número de lote parcial