QuantiGene™ Plex Human Virus-Host Panel, 50-plex

El panel anfitrión de virus en humano QuantiGene Plex es un panel de 50 plex que se centra en los objetivos de ARN relevantes para la biología de la infección por virus respiratorios en humanos e incluye objetivos relacionados con la respuesta inmune, el proceso de infección viral, la tormenta de citoquinas, los ARN virales (SARS-CoV-2, influenza, virus respiratorio sincitial/RSV) y más. Este panel se ha verificado funcionalmente. Si no se incluye un objetivo de interés concreto, se puede diseñar un panel personalizado. Cada panel nuevo y personalizado se ha diseñado, fabricado, validado y enviado en un plazo de tres semanas a partir de su pedido. Este panel se utiliza en combinación con el kit de ensayo QuantiGene Plex, que contiene todos los tampones, placas y reactivos de detección necesarios para realizar el ensayo en placas de 96 o 384 pocillos.

Las características del panel anfitrión de virus en humano QuantiGene Plex incluyen:
• Auténtico multiplexing: mide 50 genes de interés y genes de mantenimiento en el mismo pocillo sin reactividad cruzada
• Acomodación de tipos de muestras difíciles: trabaja con ARN degradado y reticulado en tejidos FFPE y sangre
• Plataforma estandarizada: utiliza formatos de placa de 96 o 384 pocillos compatibles con los sistemas Luminex 200, MagPix y FlexMap3D
• Flujo de trabajo sencillo: emplea un flujo de trabajo similar a ELISA con hibridación directa de transcripciones a perlas y etiquetado de transcripciones
• Gran inventario de objetivos validados: si es necesario agregar objetivos adicionales a este panel, seleccione entre más de 22 000 genes para crear paneles temáticos de vías y enfermedades.
• Entrega rápida para paneles personalizados: si no tenemos sus genes, podemos crear un panel personalizado en tres semanas

Los ensayos QuantiGene Plex son ensayos basados en hibridación para la cuantificación directa de ARN directamente de lisados celulares, homogeneizados de tejidos o ARN purificado, y permiten la medición de varios objetivos en el mismo pocillo mediante multiplexing. Los ensayos QuantiGene Plex contienen dos componentes: un conjunto de sondas específicas para el objetivo y gránulos de captura magnética. Usan las sondas específicas del objetivo para capturar el ARN de interés, y la tecnología de ADN ramificado amplifica después las señales fluorescentes, que se leen con un instrumento Luminex xMAP.

Objetivos: sonda de bandeja para SARS-CoV-2 (orf1ab, glicoproteína de membrana, nucleocápside), ORF3a, ORF7a, ORF8, RdRP/NSP12, proteína S, TMPRSS2, ACE2, AT2, NF-κB, DPP4 (CD26), proteína envolvente, sonda de bandeja para influenza, sonda de bandeja para RSV, CD4, CD8a, HLA-DR, CD38, CD25, CD14, CD19, RORc, TBX21, GATA3, NCAM1 (CD56), CD11d, IFITM1, CCL2 (MCP-1), CCL3 (MIP-1a), IFNg, Il12A, IL6, IL8a, IL1b, IFNa, Il10, IL2, TNFa, IL4, granzima B, IL18, IP10 (CXCL10), GM-CSF, IL17A (CTLA8), VEGF-A, GAPDH, GUSB, HPRT1, PPIB, RPL13A

Tecnología
Los ensayos QuantiGene Plex utilizan tecnología de ADN ramificado (ADNr). En primer lugar, las células (o la sangre) se lisan o las muestras de tejido (incluida la FFPE) se homogeneizan para liberar el ARN objetivo. En segundo lugar, el conjunto de sondas de oligonucleótidos se incuba con el ARN objetivo y el cordón Luminex xMAP fijado durante la noche. Durante esta incubación, las sondas se hibridan cooperativamente con la diana y capturan las sondas enlazadas a cada gránulo, capturando el ARN objetivo. En tercer lugar, la amplificación de la señal se realiza mediante hibridación secuencial del preamplificador de ADNr, el amplificador y las moléculas de la sonda de etiqueta hacia la diana. La adición de estreptavidina ficoeritrina genera una señal luminiscente directamente proporcional a la cantidad de ARNm objetivo presente en la muestra. Esto permite la cuantificación (relativa) de la expresión génica y con este panel específico permite el estudio de los procesos de infección viral, el perfil inmune del humano (anfitrión) y los biomarcadores de tormentas de citoquinas, así como la presencia de SARS-CoV-2 y cepas seleccionadas de influenza y RSV.

Aplicaciones
Las aplicaciones de investigación del ensayo QuantiGene Plex incluyen la detección de compuestos para el descubrimiento de fármacos, la verificación de biomarcadores, la eficacia de eliminación de siARN, el análisis prospectivo y/o retrospectivo de muestras de ensayos clínicos, la validación de micromatrices, la toxicología predictiva y la detección de translocaciones y genes de fusión.