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CytoVista Blocking Buffer se utiliza para bloquear la señal no específica al realizar la inmunohistoquímica (IHC) o el etiquetado inmunológico con tejidos o cultivos celulares en 3D. Este tampón está formado por PBS con 0,2 % de Triton X-100, 6 % de suero de burro y 10 % de DMSO. Ayuda a activar imágenes nítidas y brillantes a cualquier profundidad de tejido o cultivo celular 3D cuando se utiliza con otros productos CytoVista.
Las características de la familia CytoVista de reactivos de limpieza de tejidos y cultivos celulares 3D incluyen:
• Aclarado rápido del tejido marcado con fluorescencia para la obtención de imágenes 3D
• Reducción, expansión u otros cambios morfológicos mínimos en el tejido
• El flujo de trabajo sencillo no requiere ningún instrumento o equipo especial y se adapta fácilmente a la IHC
• Compatible con la mayoría de los fluoróforos, incluidos los colorantes y las proteínas fluorescentes
El flujo de trabajo de aclarado de tejidos y cultivos celulares 3D CytoVista aclara tejidos o células 3D cultivadas con cambios mínimos en la morfología o la sensibilidad de detección con casi cualquier fluoróforo. Con un protocolo fácil de usar, todo el cerebro del ratón (sección de 8 mm) se puede aclarar en 24 horas, o una sección de 1 mm en 2 horas, sin el uso de ningún instrumento o equipo especial.
El flujo de trabajo de aclarado CytoVista es compatible con la mayoría de los fluoróforos, incluidas las proteínas fluorescentes que se detectan con instrumentos de imagen fluorescentes comunes, como microscopios de campo ancho, analizadores de alto contenido, microscopios confocales y microscopios de hoja luminosa. Para los usuarios que lo utilizan por primera vez, recomendamos el kit de aclarado/tinción de tejidos CytoVista (n.º de cat. V11324) o el kit de aclarado/tinción de cultivos celulares 3D CytoVista (n.º de cat. V11325). Estos kits contienen todos los reactivos necesarios para el aclarado y la tinción de IHC.
La tecnología de aclarado CytoVista aclara lo suficiente el tejido para la obtención de imágenes fluorescentes 3D, pero, a diferencia de otras técnicas de aclarado, no cambia significativamente la morfología del tejido. Se han observado cambios morfológicos mínimos, como la reducción y la contracción. Para muestras valiosas, el aclarado se puede revertir y se puede procesar el tejido para estudios de histología, como la tinción de H&E.
Para los tejidos que son más fáciles de aclarar, como el cerebro, los pulmones, el intestino, la piel y los tejidos de menos de 250 µm de grosor, el tratamiento con el reactivo clarificante de tejidos CytoVista es suficiente para la obtención de imágenes en 3D. Sin embargo, los tejidos de más de 250 µm de grosor o que son difíciles de aclarar como el riñón, el hígado, el corazón y la placenta requerirán un tratamiento inicial con el reactivo clarificante de tejidos CytoVista, seguido por el tratamiento con el potenciador de aclarado de tejidos CytoVista.
El reactivo clarificante de cultivo celular 3D CytoVista se recomienda para esferoides u organoides de hasta 1 mm de grosor.
Para tejidos duros como hueso, cartílago y tejido conectivo, no se recomienda el reactivo clarificante de tejidos CytoVista.