La ligasa de ADN T4 cataliza la formación de enlaces fosfodiéster en presencia de ATP entre ADN bicatenario con extremos 3´-hidroxilo y 5´-fosfato. El exclusivo tampón de ligasa de ADN T4 optimiza la ligadura, que puede realizarse en 5 minutos (1). Los ácidos nucleicos de una sola cadena no son sustratos para esta enzima. Hay disponible un boletín técnico para ligasa de ADN T4.

Aplicaciones: Clonación (ligación con extremo romo o extremo cohesivo) (2). Adición de enlaces o adaptadores a ADN de extremo romo (2).

Fuente: Purificado a partir E. coliœ lisógeno NM989.

Pruebas de rendimiento y calidad: Ensayos de endodesoxirribonucleasa y exdesoxirribonucleasa 3´ y 5´; ligadura de eficacia probada.

Definición de la unidad: Una unidad cataliza el intercambio de pirofosfato marcado como 1 nmol ³²P en ATP en 20 min a 37 °C. (Una unidad es igual a aproximadamente 300 unidades de ligadura de extremo cohesivo.)

Condiciones de reacción de la unidad: 66 mM de Tris-HCl (pH 7,6), 6,6 mM de MgCl₂, 10 mM de DTT, 66 µM de ATP, pirofosfato marcado como 3,3 µM 32P y enzima en 0,1 ml durante 20 min a 37 °C.