El reactivo EZ-Link Thermo Scientific NHS-LC-biotina es un reactivo de biotinilación activado por éster de NHS de cadena larga doble para el etiquetado de aminas primarias (p. ej., lisinas de proteínas) que, gracias a la permeabilidad de su membrana, puede usarse para el etiquetado intracelular general.

Características del reactivo de EZ-Link NHS-LC-LC-biotina:

• Etiquetado de proteínas: biotinile anticuerpos u otras proteínas para la detección o purificación mediante resinas o sondas de estreptavidina.
• Penetra en la membrana: se puede utilizar para etiquetar dentro de las células (intracelular).
• Aminorreactivo: reacciona con aminas primarias (-NH2), como la cadena lateral de los lisinos (K) o los extremos de aminas de los polipéptidos.
• Irreversible: forma enlaces de amida permanentes; el brazo espaciador no se puede escindir.
• Solubilidad: debe disolverse en DMSO o DMF antes de su posterior dilución en tampones acuosos.
• Largo alcance: la longitud del brazo espaciador es de 30,5 angstroms (longitud total añadida al elemento diana) se compone de un grupo de ácido valérico de la biotina ampliado por una cadena de 13 átomos

La NHS-LC-LC-biotina está formada por succinimidil-6-(biotinamido)-6-hexanamido hexanoato. Es el más largo de tres reactivos EZ-Link NHS-Biotin que permiten la biotinilación simple y eficaz de anticuerpos, proteínas y cualquier otra biomolécula primaria que contenga aminas en solución. Con la única diferencia de la longitud de su brazo del separador, los tres reactivos de éster de NHS ofrece a los investigadores la posibilidad de optimizar experimentos de etiquetado y detección donde la repulsión estérica de la unión de biotina es un factor importante. Debido a que no están cargados y contienen simples brazos espaciadores de cadena alquilo, estos compuestos de biotina penetran en la membrana y son útiles para el etiquetado intracelular.

Fabricamos reactivos de biotina para garantizar la máxima integridad, consistencia y rendimiento global posible del producto para las aplicaciones de investigación previstas.

Los ésteres N-hidroxisulfosuccinimida (NHS) de la biotina son el tipo más popular de reactivo de biotinilación. Las biotinas activadas por NHS reaccionan eficazmente con grupos amino primarios (-NH2) en tampones alcalinos para formar enlaces amida estables. Las proteínas (como los anticuerpos) suelen tener varias aminas primarias que están disponibles como objetivos de etiquetado, incluyendo la cadena lateral de residuos de lisina (K) y el extremo N de cada polipéptido.

Las variedades de reactivos de éster de NHS de biotina difieren en longitud, solubilidad, permeabilidad celular y capacidad de escisión. Las biotinas de NHS no sulfonadas permean las células, pero deben disolverse en disolvente orgánico, como DMSO o DMF. Las biotinas de sulfo-NHS (y aquellas con separadores pegilados) son solubles en agua directamente, pero no permean las membranas. Las variedades que contienen enlaces disulfuro se pueden escindir mediante agentes reductores, lo que permite desconectar el grupo de biotina de la proteína etiquetada.