Los kits de preparación de fragmentos Fab Thermo Scientific Pierce utilizan la papaína inmovilizada para digerir los anticuerpos de IgG de humano o de ratón con el fin de separar los fragmentos Fab y Fc y purificar posteriormente los fragmentos Fab con proteína A agarosa.

Características del kit de preparación de fragmentos Fab:

• Alta capacidad: utilice el kit de tamaño estándar para fragmentar IgG de 0,25 a 4 mg.
• Productos de digestión sin enzimas: la papaína inmovilizada (resina de agarosa granulada) ayuda al control de la reacción de digestión y a la eliminación total de fragmentos de anticuerpos resultantes de la enzima proteolítica.
• Adecuado para humanos y otras especies de IgG: el procedimiento del kit está optimizado para los anticuerpos IgG humanos, de ratón y de conejo. La digestión basada en papaína es eficaz para algunas otras especies y subclases de IgG (por ejemplo, cabra y cerdo), aunque la fase de purificación requiere que el anticuerpo se una de manera eficaz a la proteína A. (Nota: Para obtener los mejores resultados con IgG1 de ratón, utilice el número de pieza 44980).
• Proporciona fragmentos Fab listos para usar: la digestión y la recuperación final de fragmentos Fab purificados se produce en un tampón de fosfato de sodio de pH neutro adecuado para su almacenamiento o para su uso inmediato en aplicaciones convencionales
• Completo: los kits incluyen todos los reactivos necesarios para preparar y purificar fragmentos de anticuerpos
• Rápido: el formato de centrifugación reduce enormemente el tiempo de procesamiento de las muestras
• Flexible: se incluyen protocolos flexibles para múltiples especies y subclases de IgG, así como para el tamaño y la concentración de la muestra.
• Eficiente: mayor rendimiento y pureza de las muestras

Estos kits de preparación de fragmentos Fab son adecuados para IgG humanos, de conejo, de ratón, así como para otras especies y subclases de IgG. La reacción de la digestión de anticuerpos de papaína se realiza en prácticas columnas de centrifugación desechables que permiten extraer con eficacia la proteasa inmovilizada y recuperar por completo los fragmentos de IgG. Los kits también incluyen tampones y columnas de centrifugación NAb de proteína A Thermo Scientific para purificar eficazmente los fragmentos resultantes. La proteína A se une a los fragmentos Fc y a la IgG sin digerir, lo que permite recuperar los fragmentos Fab puros de la fracción no retenida. Los kits también incluyen columnas de desalación por centrifugación Thermo Scientific Zeba para preparar la muestra de IgG rápidamente sin dilución en lugar de utilizar pasos de diálisis que requieren mucho tiempo.

Los kits utilizan papaína, una cisteína endopeptidasa inespecífica, para escindir enzimáticamente la IgG completa justo por encima de la región bisagra y crear dos fragmentos Fab y un fragmento Fc independientes por molécula de anticuerpo. Puesto que la papaína se proporciona inmovilizada como resina de agarosa en gránulos, la reacción de digestión se detiene fácilmente al extraer la resina de la solución de IgG; como resultado, se obtienen productos de digestión sin enzimas.

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