El kit de ensayo de esfingomielinasa Amplex™ Red constituye un método fluorimétrico sensible, rápido y sencillo para detectar concentraciones muy bajas de esfingomielinasa mediante un lector de microplacas de fluorescencia o fluorímetro.

Consulte nuestra línea completa de ensayos de microplacas de fluorescencia.

• Detecta niveles de actividad de esfingomielinasa de tan solo 80 µU/ml en un volumen de ensayo de 200 µl
• Su formato permite realizar varias mediciones en un punto de tiempo
• Diseñado para una mínima interferencia de autofluorescencia

En este ensayo de acoplamiento enzimático, la actividad de esfingomielinasa se supervisa indirectamente usando 10-acetil-3,7-dihidroxifenoxacina (reactivo Amplex™ Red), una sonda fluorogénica sensible para el peróxido de hidrógeno. La esfingomielinasa hidroliza la esfingomielina para producir ceramida y fosforilcolina. Se añade fosfatasa alcalina, que hidroliza la fosforilcolina para formar la colina. La colina se oxida mediante la colina oxidasa para formar betaína y peróxido de hidrógeno. En presencia de la peroxidasa de rábano, el peróxido de hidrógeno reacciona con el reactivo Amplex™ Red en una proporción estequiométrica 1:1 para crear un producto altamente fluorescente, la resorufina.

Como la resorufina tiene unos valores máximos de absorción y emisión de fluorescencia de aproximadamente 571 nm y 585 nm respectivamente, hay poca interferencia de autofluorescencia en la mayoría de las muestras biológicas.

Utilice ensayos Amplex™ Red para una amplia gama de investigaciones
Hay disponible una amplia variedad de ensayos Amplex™ Red para el estudio de la señalización de células y lípidos, la neurobiología, el funcionamiento de procesos inflamatorios e inmunitarios, y el metabolismo. También ofrecemos el reactivo Amplex™ UltraRed (n.º de cat. A36006), un reactivo de segunda generación que proporciona una mayor sensibilidad y fluorescencia más brillante, y el reactivo de parada Amplex™ Red/UltraRed (n.º cat. A33855). El reactivo de parada Amplex™ Red/UltraRed ofrece comodidad y control, ya que permite terminar la reacción de generación de la señal de fluorescencia en un momento determinado por el usuario. Después de añadir el reactivo de parada, la señal de fluorescencia permanece estable durante al menos tres horas. También hay disponibles diseños de ensayos y envases personalizados.