Pueden usarse nucleidos dUTP, OBEA-dCTP y UTP etiquetados con colorante Molecular Probes™ ChromaTide™ para sintetizar sondas de ADN etiquetadas sin necesidad de nucleidos etiquetados con radioisótopos peligrosos y costosos. Estos nucleidos pueden incorporarse mediante técnicas estándar de biología molecular; a continuación, las sondas etiquetadas pueden utilizarse en protocolos de hibridación
in situ, micromatrices o transferencia. Los nucleidos etiquetados con colorante ChromaTide™ están disponibles en diferentes colores fluorescentes para facilitar el análisis multicolor.
Especificaciones de los nucleidos etiquetados con ChromaTide™:
• Ex/Em del colorante: Alexa Fluor™ 488-5-dUTP (490/520 nm)
• Longitud del enlazador alquinilamino: 5 átomosMétodos para incorporar nucleidos ChromaTide™ en sondas
• Translación de mellas (nick translation)
• Etiquetado de primers aleatorios
• Etiquetado final con desoxinucleotidil transferasa terminal
• Transcripción inversa
• Amplificación de PCR Consulte
Métodos para la incorporación enzimática de dUTP ChromaTide™ para obtener directrices específicas para cada uno de estos métodos.
Los colorantes fluorescentes Alexa Fluor™ y BODIPY™ generan excelentes sondas Las sondas generadas con nucleidos etiquetados pueden usarse para técnicas multicolores como la hibridación
in situ y la hibridación en matrices. Nuestros conjugados de colorantes patentados BODIPY™ y Alexa Fluor™ son excepcionalmente brillantes, fotoestables y esencialmente insensibles al pH. El estrecho perfil de emisión de los colorantes BODIPY™ ayuda a asegurar una superposición espectral mínima. Los colorantes Alexa Fluor™ son muy solubles en agua, al igual que las sondas de ADN fabricadas a partir de ellos, lo que los convierte en las etiquetas preferidas para la hibridación fluorescente
in situ.
Los enlazadores largos mejoran el rendimiento Los nucleidos dUTP y UTP ChromaTide™ se modifican en la posición C-5 de la uridina a través de un único enlazador alquinilamino, que proporciona un espaciador entre el nucleótido y el colorante para reducir las interacciones entre ellos. El número en el nombre del producto, por ejemplo, “12” en fluoresceína-12 dUTP, indica la longitud neta del separador, en átomos. Estos espaciadores dan como resultado conjugados más brillantes y una mayor accesibilidad a los reactivos de detección secundaria.
Para obtener una lista completa de nuestros reactivos ChromaTide™:
Nucleidos etiquetados con aha y Molecular Probes ChromaTide™: Tabla 8.5. Para obtener información adicional sobre estos reactivos de etiquetado, lea la
Sección 8.2: Etiquetado de oligonucleótidos y ácidos nucleicos del Manual de Molecular Probes™.
Para uso exclusivo en investigación. No diseñado para uso diagnóstico o terapéutico en humanos ni en animales.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.