Bac-to-Bac™ Vector Kit

Das Bac-to-Bac™ Vektor-Kit enthält einen pFastBac™1 Vektor sowie einen Expressionskontrollvektor, der als Teil des Bac-to-Bac™ Baculovirus-Expressionssystems (Kat. Nr. 10359-016) die effiziente Produktion von rekombinantem Baculovirus für Expressionstests in Insektenzellen ermöglicht. Das Bac-zu-Bac™ -System beruht eher auf der Erzeugung rekombinanter Baculoviren durch stellenspezifische Transposition in E. coli als auf homologer Rekombination in Insektenzellen (Abb. 1). Dieses System hat folgende Merkmale:

• Zeitsparender Expressions-Bacmid. Mit Bac-to-Bac™ rekombiniert die Expressionskassette des pFastBac™ Vektors mit dem Parental-Bacmid in DH10Bac™ E. coli Kompetenten Zellen (nicht im Lieferumfang dieses Vektor-Kits enthalten), um ein Expressions-Bacmid zu bilden. Das Bacmid wird dann in Insektenzellen zur Produktion rekombinanter Baculovirus-Partikel transfiziert.
• Einfaches Kolonie-Screening. Das Parental-Bacmid in DH10Bac™ E. coli enthält ein Segment des lacZα-Gens. Das lacZα-Gen wird bei der Umsetzung der Expressionskassette in das Bacmid gestört, wodurch eine blau/weiße Selektion von Rekombinanten ermöglicht wird. Dies erleichtert die Identifizierung von rekombinanten Kolonien.
Das Bac-to-Bac™ Baculovirus-Expressionssystem wurde für die schnelle, kleine Produktion von rekombinantem Baculovirus entwickelt. Der von diesem Kit bereitgestellte pFastBac™ 1 Vektor verfügt über einen starken Polyedrin-Promotor für die Proteinexpression und eine große Stelle für mehrere Klonierungen zum einfacheren Klonieren.