Das Thermo Scientific Pierce Fluoreszenz-Proteaseassay-Kit misst die gesamte Protease-Aktivität in Proben und bietet eine Möglichkeit, den Fortschritt der Protease-Isolierungsverfahren zu beurteilen oder die Protease-Kontamination in biologischen Proben zu quantifizieren.

Dieses Kit enthält Fluorescein-markiertes Kasein als Substrat für die Beurteilung der Protease-Aktivität in einer Probe durch Fluoreszenzresonanz-Energieübertragung (FRET) mit einem Standard-Fluorometer oder Fluoreszenz-Polarisation (FP) mit geeigneten Instrumenten. FTC-Casein ist ein natives Casein, das durch einen großen molaren Überschuss Fluoreszeinisothiocyanat (FITC) markiert wurde. Die Fluoreszenzeigenschaften dieses „schwer“ markierten, intakten Proteinsubstrats ändern sich dramatisch durch die Digestion durch Proteasen, wodurch die Proteolyse messbar wird.

Eigenschaften des Fluoreszenz-Proteaseassay-Kits:

• Caseinsubstrat — Messung der Aktivität einer Protease, die Casein in Peptidfragmente spaltet
• Trypsin-Standard — Quantifizierung der Protease-Aktivität relativ zu Trypsin, eine allgemein anerkannte Referenz
• Hochempfindlich —1000-mal empfindlicher als Assays, die unmodifizierte Formen von Casein verwenden
• Einfach und schnell — Teströhrchen- und Mikrotiterplatten-Protokolle sind in weniger als einer Stunde abgeschlossen
• Homogen — Nur Zufügungsschritte; keine Trennung, Übertragung oder Stoppschritte erforderlich
• Anpassbar — Zeit, Temperatur und pH-Wert können einfach angepasst werden, um die Empfindlichkeit für Proteasen zu optimieren

Anwendungen:
• Bestimmen Sie die funktionale Integrität und den Gesamtfortschritt der Proteasereinigung
• Quantifizieren Sie die Protease-Kontamination in Proteinproben
• Charakterisieren Sie die Aktivität ungewöhnlicher Proteasen im Vergleich zu Trypsin
• Beurteilen Sie die Pufferbedingungen hinsichtlich ihrer Affekte auf Proteasefunktion und -aktivität

Zusätzliche Spezifikationen:
• Substrat: Fluorescein-markiertes Kasein (FITC-Kasein); separat erhältlich als Teilenummer 23267
• Grundlage des Assays: Änderung der Fluoreszenzresonanz (FRET) oder Fluoreszenzpolarisation (FP)
• Messung: Instrument mit Fluorescein-Anregung und -Emissionsfiltern (485/538 nm)

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