Verwenden Sie Thermo Scientific Pierce Rekombinantes Alkalische-Phosphatase-konjugiertes Protein A/G, um Antikörper, insbesondere IgG-Isotypen, vieler verschiedener Arten in Western-Blotting-, ELISA-, IHC- und anderen Immunassay-Protokollen zu untersuchen und nachzuweisen.

Merkmale von rekombinantem Protein A/G:

• Enthält vier Fc-bindende Domänen von Protein A und zwei von Protein G
• Bietet Bindung für alle Antikörperspezies und Unterklassen, die entweder von Protein A oder Protein G erkannt werden

Die erweiterten Fc-bindenden Eigenschaften von Protein A/G machen es zu einem beliebten Werkzeug bei der Untersuchung und Reinigung von Immunglobulinen. Protein A/G bindet an alle Human-IgG-Subklassen, IgA, IgE, IgM und in geringerem Maße IgD; es bindet jedoch nicht IgA, IgM oder Serumalbumin der Maus. Protein A/G ist ein ideales Hilfsmittel für die Aufreinigung und den Nachweis monoklonaler Antikörper der Maus aus IgG-Subklassen ohne Interferenzen dieser anderen Serumproteine. Einzelne Unterklassen von monoklonalen Mausantikörpern haben sehr wahrscheinlich eine stärkere Affinität zum chimären Protein A/G als zu Protein A oder Protein G.

Eigenschaften von rekombinantem Protein A/G:
• Quelle: E. coli
• Molekulargewicht: 50.460 (apparentes Molekulargewicht von SDS-SEITE: 40.000 bis 45.000)
• Form: salzfreies Pulver
• A280 einer 0,1%-igen Lösung: ca. 0,505
•Isoelektrischer Punkt (pI): 4,65

Die Genfusion der Fc-bindenden Domänen von Protein A und Protein G hat zur Produktion eines strukturell und funktionell chimären Proteins mit einer breiteren Bindung als Protein A oder Protein G allein geführt. Während der Fusion wird die Gensequenz von Protein G, die für die Serumalbumin-Bindungsstelle kodiert, eliminiert. Dieses Protein wird in E. coli exprimiert und während der Fermentation in das umgebende Medium sekretiert. Das gewonnene Produkt ist in Qualität und Ausbeute konsistent, da der Bakterienwirt so konstruiert ist, dass ihm wichtige Proteolyseaktivitäten fehlen. Die Bindung ist weniger pH-abhängig als bei Protein A oder Protein G allein und ist bei pH 5 bis 8 effizient.

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