MagMAX™ DNA Multi-Sample Kit

Die MagMAX™ DNA Multi-Sample-Kits wurden für die schnelle Aufreinigung hochwertiger genomischer DNA aus diversen Probentypen entwickelt, darunter auch Blut und Blutkarten, Gewebe, Mäuseschwänze, Wangenabstriche, Buffy-Coats und Kulturzellen. Diese Aufreinigungs-Kits bedienen sich der auf magnetischen Beads basierenden MagMAX™ Isolationstechnologie für Nukleinsäuren, um hohe Erträge aufgereinigter DNA herzustellen, die frei von Hemmstoffen ist, welche sich auf Downstream-Reaktionen wie Genotypisierungs-Assays, CE- und Sequenzierung der neuesten Generation sowie Schmelzanalysen bei hoher Auflösung auswirken können. Das 50 Präparate-Kit wurde für die manuelle Verarbeitung von Mikrozentrifugen-Röhrchen entwickelt.

Die Anforderungen an DNA-Ausbeute und -Reinheit haben sich mit der Entwicklung neuer Analysemethoden und -technologien wie der Hochdurchsatz-Genotypisierung und Plattformen mit DNA-Sequenzierung der nächsten Generation immer weiter erhöht. Die MagMAX™ DNA Multi-Proben-Kits erfüllen diese Herausforderung durch die Erzeugung hochreiner DNA, die frei von Nukleasen, Proteinen und anderen Inhibitoren nachgelagerter enzymatischer Reaktionen ist.
Wie in Tabelle 1 dargestellt kann mit den MagMAX™ DNA Multi-Proben-Kits aus einer Vielzahl von Materialien DNA mit hoher Ausbeute und Reinheit gewonnen werden. Im Gegensatz dazu erfordern Filtermembran–basierte Verfahren oft unterschiedliche Kit-Konfigurationen je nach Zufuhrmaterial. Das MagMAX™ DNA Multi-Proben-Kit (Röhrchenformat, manuelle Verarbeitung) kann für Anwendungsbereiche wünschenswert sein, in denen maximaler Ertrag erforderlich ist, bei kleinen Durchlaufgrößen oder zu DNA-Archivierungszwecken, denn es fasst auch eine größere Probenzufuhr. Die für die meisten Routineanwendungen geeigneten DNA-Erträge können mit den MagMAX™ 96 DNA-Multi-Proben-Kits (96 Well-Plattenformat, kompatibel mit der automatisierten Handhabung) (Tabelle 1) erzielt werden.

Das MagMAX™ DNA Multi-Proben-Kit liefert auch hohe DNA-Ausbeute aus lipid- oder glykogenreichen Proben, wie Hirn- bzw. Lebergewebe. Abbildung 1 zeigt, dass mit dem MagMAX™ DNA Multi-ProbenKit mehr als doppelt so viel DNA aus Gewebe aufgereinigt wurde wie mit der Filtermembran–basierten Methode eines großen Wettbewerbers’

Die meisten enzymatischen molekularen Anwendungen neigen zur Hemmung durch Analyten, die aus der Probenmatrix (z. B. Häm, Heparin, Salze, Protein) oder der Reinigungsmethode selbst (Phenol, Salze, Alkohol) übertragen werden. Abbildung 2 zeigt die Wirkung der DNA-Reinheit auf empfindliche molekulare Anwendungen wie die quantitative PCR (qPCR). Die DNA wurde mit dem MagMAX-™-DNA Multi-Proben-Kit oder einem Filtermembran–basierten Kit eines Wettbewerbers aus Blut extrahiert und einer Echtzeit-PCR-Analyse unterzogen.’ Die Ct-Werte des Zyklusschwellenwerts mit DNA, die mithilfe des MagMAX™ DNA Multi-Proben-Kits aufgereinigt wurde, waren niedriger als die mit DNA, die mit dem Filtermembran–Kit aufgereinigt wurde. Das weist darauf hin, dass das MagMAX™-Kit DNA mit höherer Reinheit liefert.

Die MagMAX™ DNA Multi-Proben-Kits bieten aufgereinigte DNA, die sich für zahlreiche Anwendungsabläufe von Applied Biosystems eignet (Abbildung 3), einschließlich SNP-Genotypisierung und DNA-Sequenzierungsanalyse (siehe Abbildung 4). In dem MagMAX™ DNA Multi-Proben-Kit Produktbulletin finden Sie eine vollständige Leistungsbeschreibung der mit den MagMAX™ DNA Multi-Proben-Kits aufgereinigten DNA für TaqMan™ SNP-Genotypisierungs-Assays und für die DNA-Sequenzanalyse mit BigDye™ Chemistry.