Ambion™ In Vivo Negative Control #1 siRNA

Ambion™ In-vivo-siRNA-Kontrollen
• Validierte siRNA-Kontrollen zur Optimierung von siRNA-Experimenten, die gegen codierende und nicht codierende Transkripte gerichtet sind
• Positivkontroll-siRNAs, die in verschiedenen, häufig verwendeten Zelllinien auf Funktionalität getestet wurden
• Negativkontrollen mit funktionell bestätigter minimaler Auswirkung auf Zellproliferation und Zellviabilität
• Einschließlich Silencer™ Select-Modifikationen für verbesserte Spezifität oder Ambion™ In-vivo-Modifikationen für verbesserte Stabilität
• Für die Verwendung in Human-, Maus- und Rattenzellen

Was sind Ambion™ In-vivo siRNAs?
Ambion™ In-vivo-siRNAs wurden mit dem bewährten Silencer™ Select Algorithmus entwickelt und enthalten chemische Modifikationen für eine überragende Serumstabilität bei In-vivo-Abgabe. Die zusätzliche Serumstabilität beeinträchtigt nicht die Leistungsfähigkeit der siRNAs. Ambion™ In-vivo-siRNAs haben sich als nicht toxisch in vivo (Maus) und nicht immunogen (zellbasierte Assays) erwiesen. In zellbasierten Assays weisen Ambion™ In-vivo-siRNAs eine äquivalente oder bessere Potenz auf als Silencer™ Select-siRNAs. Das Ergebnis ist ein besseres Vertrauen in Ihre In-vivo-RNAi-Experimente, ein besserer Knock-down in Kombination mit einer effizienten Darreichungsform und die Gewährleistung begrenzter nicht spezifischer Effekte.

siRNA-Negativkontrollen
 – siRNAs mit Sequenzen, die gegen kein Genprodukt gerichtet sind – sind entscheidend, um die Folgen einer siRNA-Verwendung abzuschätzen und eine Referenzlinie für den Vergleich von Proben, die mit siRNAs behandelt wurden, bereitzustellen. Ambion™ In-vivo-siRNAs besitzen keine signifikante Sequenzähnlichkeit mit humanen, Maus- oder Ratten-Gensequenzen. Bei Microarray-Analysetests zeigten diese Negative Control siRNAs nur minimale Auswirkungen auf die Genexpression. Darüber hinaus wurden diese Negativkontroll-siRNAs in multiparametrischen zellbasierten Assays getestet und in den getesteten Zelllinien wurde kein signifikanter Einfluss auf Zellproliferation, Lebensfähigkeit oder Morphologie nachgewiesen.

Qualitätskontrolle
Ambion™ synthetisiert und reinigt jede Ambion™ In-vivo-siRNA in hochmodernen Einrichtungen, um höchsten Qualitätsansprüchen gerecht zu werden. Im Rahmen unserer strengen Qualitätskontrolle wird jedes RNA-Oligonukleotid mit MALDI-TOF-Massenspektrometrie analysiert, und die Reinheit wird durch ein analytisches HPLC-System überwacht. Jede gebundene siRNA wird durch Gel-Elektrophorese auf ein korrektes Annealing der Stränge geprüft, um ein Höchstmaß an Qualität zu gewährleisten. Das Ergebnis ist eine hochwertige siRNA, die aufgereinigt und gebrauchsfertig ist.

In-vivo-fähige Kontrollen
Unsere “In-vivo-fähigen” Kontroll-siRNAs unterliegen dieser zusätzlichen Aufreinigung und Teststufe, die für die Einführung von siRNAs in Tiere erforderlich ist. Nach der HPLC-Aufreinigung und der Anlagerung wird jede siRNA mit einem Verfahren weiter gereinigt, das überschüssiges Salz über eine halbdurchlässige Membran entfernt. Das Ergebnis ist eine hochreine siRNA mit minimalem Salzgehalt, die für In-vivo-Anwendungen geeignet ist. In-vivo-siRNAs werden dann steril gefiltert und auf das Vorhandensein von Endotoxin getestet. Bei Konzentrationen von 50 μM in Gegenwart von entionisiertem Wasser enthalten In-vivo-fähige siRNAs unter 5,0 mM Na+, unter 0,06 mM K+ und unter 0,02 mM Mg2+.