Thermo Scientific HisPur Kobalt-Spin-Säulen enthalten ein Tetradentat-chelatierendes Agaroseharz, das mit zweiwertigem Kobalt (Co
2+) aufgeladen ist, um hochreine his-markierte Proteinen ohne Metallkontamination zu erhalten.
Merkmale von HisPur-Kobaltharz:
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Hohe Reinheit—Mehr als 10 mg reines His-Tag-Protein pro Milliliter Harz ohne Optimierung der Imidazol-Waschbedingungen
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Spezifität—Der Cobalt-Chelat-Koordinationskern bindet weniger Wirtsproteinkontaminanten, was zu einem geringeren Hintergrund führt als bei als Nickelharzen
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Geringe Metallauswaschung—keine Metallkontamination in eluierten histidinmarkierten Proteinproben
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Vielfältigkeit— Proteinaufreinigung unter nativen oder denaturierenden Bedingungen; kompatibel mit Thermo Scientific Pierce Zelllysereagenzien und einer Vielzahl von Pufferadditiven
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Kosteneffektiv—Das Harz kann mehrfach wiederverwendet oder nach einmaliger Verwendung entsorgt werden
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Flexibilität—Erhältlich als Schüttharz, Kits, vordispensierte Säulen, Chromatographie-Kassettenund 96-Well-Filterplatten
Bindet verglichen mit Ni-IDA und tetradentaten Ni
2+-Chelatharzen und HisPur Cobaltharz histidinmarkierte Proteine mit höherer Spezifität (weniger Bindung außerhalb des Zieles) und gibt sie unter schonenderen Bedingungen frei (niedrigere Imidazolkonzentrationen). Obwohl Ni(
2+)-Chelatharze eine höhere Proteinausbeute erzielen, ist die Bindung etwas wahllos, was zu einer suboptimalen Reinheit führt. Oft sind zusätzliche Reinigungsschritte erforderlich. Im Gegensatz lässt sich durch Cobalt eine Optimierung der Reinheit ohne Ertragseinbußen erzielen. HisPur Cobaltharz bindet weniger unspezifische Proteine, zeigt weniger Metallauswaschung und ermöglicht weniger strenge Elutionsbedingungen als Nickelharze.
HisPur Cobalt IMAC-Harz bindet speziell His-markiertes rekombinantes Protein, das durch eine leichte Imidazol-Elution effizient gewonnen werden kann. Pro Milliliter Harz kann mehr als 10 mg His-markiertes Protein gebunden werden, indem ein 28 kDa-Fusionsprotein verwendet wird, das aus einem
E. coli-Lysat exprimiert und gereinigt wird.
Verschiedene His-markierte Proteine können mit ähnlicher oder höherer Reinheit wiedergewonnen werden als aus anderen verfügbaren Nickel- oder Cobalt-IMAC-Harzen, die in Spin- oder Schwerkraftsäulen gewonnen werden. Es wurde ein Vergleich zwischen den Leistungen von HisPur Cobalt Resin und von IMAC-Harzen anderer Anbieter angestellt, wobei unterschiedliche His--Tag-Proteine unterschiedlicher Größen und Expressionslevels untersucht wurden. Das Ergebnis zeigt, dass HisPur Cobaltharz maximale Proteinreinheit ohne Verzicht auf hohe Proteinerträge bietet.
Verfügbare Formate:•
Harzaufschlämmungen — Vernetzte 6 %-ige Agarose-Beads; Flaschen mit 10, 100 und 500 ml
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Spin-Säulen — Säulen mit 0,2 ml (Mikrozentrifuge), 1 ml und 3 ml
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Aufreinigungskits — Komplettkits in allen drei Säulengrößen
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Chromatographiekassetten—Weitere Informationen und Daten zu HisPur-Chromatographiekassetten•
96-Well Spin-Platten
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