Thermo Scientific HisPur Kobalt-Chromatographiekassetten enthalten ein vierzähniges, chelatbildendes Agaroseharz, das mit zweiwertigem Kobalt (Co²⁺) geladen ist, um hochreine His-markierte Proteinen ohne Metallkontamination zu erhalten.

Merkmale des HisPur Kobaltharzes:

• Hohe Reinheit — Mehr als 10 mg reines His-markiertes Protein pro Milliliter Harz ohne Optimierung der Imidazol-Waschbedingungen
• Spezifität — Der Kobalt-Chelat-Koordinationskern bindet weniger Wirtsproteinkontaminanten, was zu einem geringeren Hintergrund führt als bei Nickelharzen
• Geringe Metalllaugung — Keine Metallkontamination in eluierten Histidin-markierten Proteinproben
• Vielseitig — Proteinreinigung unter nativen oder denaturierenden Bedingungen; kompatibel mit Thermo Scientific Pierce Zelllyse-Reagenzien und einer Vielzahl von Pufferzusätzen
• Kosteneffektiv — Das Harz kann mehrfach wiederverwendet oder nach einmaliger Verwendung entsorgt werden
• Flexibilität — Erhältlich als Schüttharz, Kits, vordispensierte Säulen, Chromatographiekartuschen und 96-Well-Filterplatten

Verglichen mit Ni-IDA und vierzähnigen Ni²⁺-Chelatharzen bindet HisPur Kobaltharz Histidin-markierte Proteine mit höherer Spezifität (weniger Off-Target-Bindungen) und gibt sie unter schonenderen Bedingungen wieder frei (geringe Imidazol-Konzentrationen). Obwohl Ni²⁺-Chelatharze eine höhere Proteinausbeute erzielen, ist die Bindung eher wahllos, was zu einer suboptimalen Reinheit führt. Oft sind zusätzliche Reinigungsschritte erforderlich. Im Gegensatz lässt sich durch Cobalt eine Optimierung der Reinheit ohne Ertragseinbußen erzielen. HisPur Kobaltharz bindet weniger unspezifische Proteine, zeigt weniger Metalllaugung und ermöglicht weniger strenge Elutionsbedingungen als Nickelharze.

HisPur Kobalt IMAC-Harz bindet speziell His-markiertes rekombinantes Protein, das durch eine milde Imidazol-Elution effizient gewonnen werden kann. Pro Milliliter Harz kann mehr als 10 mg His-markiertes Protein gebunden werden, indem ein 28 kDa-Fusionsprotein verwendet wird, das exprimiert und aus einem E. coli-Lysat gereinigt wird.

Im Gegensatz zu anderen verfügbaren Nickel- oder Kobalt-IMAC-Harzen, die Spin- oder Schwerkraftsäulenformate verwenden, können so verschiedene His-markierte Proteine mit ähnlicher oder höherer Reinheit zurückgewonnen werden. Es wurde ein Vergleich zwischen den Leistungen von HisPur Cobalt Resin und von IMAC-Harzen anderer Anbieter angestellt, wobei verschiedene His-markierte Proteine mit unterschiedlichen Größen und Expressionswerten untersucht wurden. Das Ergebnis zeigt, dass HisPur Kobaltharz maximale Proteinreinheit bietet, ohne Verzicht auf hohe Proteinerträge.

Verfügbare Formate:
• Harzsuspensionen — Vernetzte, 6%ige Agarosebeads, 10 ml-, 100 ml-, 500 ml-Flaschen
• Spin-Säulen — 0,2 ml- (Mikrozentrifuge), 1 ml- und 3 ml-Säulen
• Aufreinigungskits — Komplettkits in allen drei Säulengrößen
• Chromatographie-Kassetten — Mehr erfahren und Daten zu den HisPur Chromatographie-Kassetten ansehen
• 96-Well-Spin-Platten

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