Das Amplex™ Red Acetylcholin/Acetylcholinesterase-Assay-Kit stellt eine ultraempfindliche Methode zum Nachweis der Acetylcholinesterase (AChE)-Aktivität in einem Fluoreszenz-Mikrotiterplatten-Lesegerät oder Fluorometer dar.

Sehen Sie sich unser komplettes Sortiment an Fluoreszenz-Mikroplatten-Assays an.

• Erkennen Sie AChE-Aktivitätslevel von bis zu 0,002 U/ml in einer Stunde
• Erkennen Sie Acetylcholin-Konzentrationen von bis zu 0,3 µM mit überschüssigem AChE
• Erzielen Sie Nachweisbereiche von 0,3 bis 100 µM Acetylcholin
• Das Format ermöglicht Messungen an mehreren Zeitpunkten
• Ausgelegt für minimale Autofluoreszenz-Interferenzen

Die AChE-Aktivität wird indirekt mit 10-Acetyl-3,7-Dihydroxyphenoxazin (Amplex™ Red Reagenz) überwacht, einer empfindlichen fluorogenen Sonde für Wasserstoffperoxid. AChE wandelt das Acetylcholin-Substrat in Cholin um, das anschließend durch Cholinoxidase zu Betain und Wasserstoffperoxid oxidiert wird. In Gegenwart von Meerrettichperoxidase reagiert Wasserstoffperoxid mit dem Amplex™ Red Reagenz in einem stöchiometrischen Verhältnis von 1:1, um das hochfluoreszierende Produkt Resorufin zu erzeugen.

Da Resorufin Absorptions- und Fluoreszenz-Emissionsmaxima von etwa 571 bzw. 585 nm aufweist, gibt es in den meisten biologischen Proben nur geringe Interferenzen durch die Autofluoreszenz. Experimente mit aufgereinigtem AChE aus Zitteraalen zeigen, dass das Amplex™ Red Acetylcholin/Acetylcholinesterase-Assay-Kit AChE-Konzentrationen von bis zu 0,002 U/ml mit einer Reaktionszeit von einer Stunde erkennen kann. Durch die Bereitstellung eines Überschusses von AChE im Assay kann das Kit auch zum Nachweis von Acetylcholin-Konzentrationen von bis zu 0,3 µM verwendet werden, wobei ein Nachweisbereich von 0,3 bis 100 µM Acetylcholin besteht.

Verwenden Sie Amplex™ Red Assays für eine breite Palette von Untersuchungen
Eine Vielzahl validierter Amplex™ Red Assays steht für die Untersuchung von Zellsignalisierungs- und Lipiden, Neurobiologie, Entzündungen und Immunfunktionen sowie Metabolismen zur Verfügung. Wir bieten auch Amplex™ UltraRot Reagenz an (Kat.- Nr. A36006), ein Reagenz der zweiten Generation mit einer größeren Empfindlichkeit und helleren Fluoreszenz, sowie das Amplex™ Rot/UltraRot Stoppreagenz (Kat.- Nr. A33855). Das Amplex™ Rot/UltraRot Stoppreagenz sorgt für praktische und kontrollierte Bedingungen, da damit die Reaktion zur Erzeugung des Fluoreszenzsignals zu einem vom Anwender bestimmten Zeitpunkt beendet werden kann. Nach Zugabe des Stoppreagenzes bleibt das Fluoreszenzsignal für mindestens drei Stunden stabil. Kundenspezifische Assay-Designs und Verpackungen sind ebenfalls erhältlich.