Das Ca2+-Ionophor A-23187 wird häufig für In-situ-Kalibrierungen von fluoreszierenden Ca2+-Indikatoren verwendet, um intrazelluläre und extrazelluläre Ca2+-Konzentrationen auf Raumtemperatur zu bringen und Mn2+ in die Zelle zu lassen, um intrazelluläre Farbstofffluoreszenz zu löschen. Obwohl die intrinsische Fluoreszenz von A-23197 zu für die Verwendung mit UV-anregbaren Calcium-Indikatoren wie Fura-2, Indo-1 und Quin-2 zu hoch ist, eignet sie sich für die Verwendung mit sichtbaren lichtanregbaren Indikatoren, einschließlich Fluo-3, Fluo-4, Calcium Green und Rhod-2. A-23187 kann auch verwendet werden, um extrazelluläre und intrazelluläre Mg2+-Konzentrationen auf Raumtemperatur zu bringen, wodurch es für die Kalibrierung von Mg2+-Indikatoren nützlich ist.