Biotin XX Tyramide SuperBoost™ Kit, Goat anti-Mouse IgG

Die SuperBoost™ Tyramid-Signalamplifikation ist die empfindlichste Methode zum Nachweis von schwach konzentrierten Zielen in der Multiplex-fähigen Fluoreszenz-Immunzytochemie (ICC), Immunhistochemie (IHC) und In-situ-Hybridisierung (ISH). SuperBoost Sets kombinieren die Helligkeit von Alexa Fluor™ Farbstoffen mit der überlegenen Signalverstärkung einer poly-HRP-vermittelten Tyramid-Markierungsreaktion, um eine 10 bis 200 Mal höhere Empfindlichkeit als bei Standardmethoden zu erzielen. Die Empfindlichkeit des SuperBoost Kits ist auch 2 bis 10 Mal höher als die normaler Tyramid-Amplifikationstechniken wie TSA™. Für eine herausragende Forschung liefern SuperBoost Kits deutlichere Ergebnisse und bieten so eine klare Sicht in kritische Bereiche, die mithilfe von Standard-Bildgebungsverfahren nicht erkannt werden können.

SuperBoost Kits sind einfach in der Anwendung und können problemlos an die Standard-ICC-, IHC- oder FISH-Versuchsprotokolle angepasst werden, wobei Zellen oder Gewebe jeglichen Typs verwendet werden. Zellen, die mit einem SuperBoost Kit gekennzeichnet sind, können mit jedem Mikroskop abgebildet werden, wodurch hochauflösende Multiplex-Bilder erzeugt werden. Dieses spezielle Kit enthält Biotin XX Tyramid mit polyklonalen HRP-konjugiertem Ziege-Anti-Maus-IgG. Für den Nachweis und die zusätzliche Signalverstärkung wird konjugiertes Streptavidin verwendet, um spezifisch abgelagertes Biotin XX nachzuweisen.

Merkmale des SuperBoost Kits sind u. a.:
• Überlegene Empfindlichkeit für den Nachweis von schwach konzentrierten oder schwer nachweisbaren Zielen durch Fluoreszenzbildgebung
• Einfaches Protokoll und Nachweis mit Standardfiltern
• Geeignet für hochauflösende Multiplex-Bilder – Co-Markierung mit DAPI, sekundären Antikörpern und anderen SuperBoost Kits
• Es werden 10 bis 100 Mal weniger primäre Antikörper benötigt als bei Standard-ICC/IHC/ISH-Versuchen

SuperBoost Kits basieren auf dem Tyramid-Signalamplifikationssystem, das die katalytische Aktivität der Meerrettichperoxidase (HRP) verwendet, um eine High-Density-Markierung eines Zielproteins oder einer Nukleinsäuresequenz in situ zu erzeugen. Ein typisches ICC/IHC/ISH-Experiment mit einem SuperBoost Kit erfordert 10 bis 100 Mal weniger primäre Antikörper als Standard-ICC/IHC/ISH-Experimente. SuperBoost Kits bieten eine überlegene spezifische Signalintensität über Hintergrund. Dies ermöglicht eine einfache Optimierung des Protokolls für die Erkennung spezifischer Signale in Proben, bei denen eine hohe endogene Autofluoreszenz beobachtet wird.

Vorteile der SuperBoost Kits

Poly-HRP-Verstärkung: Im Gegensatz zu TSA verwenden SuperBoost Kits polyHRP-konjugierte Sekundärantikörper. In solchen Systemen werden mehrere HRP-Enzyme mit kurzen Polymeren konjugiert, wodurch das Signal im Vergleich zu regulären HRP-Systemen mehrfach verstärkt wird. Das Poly-HRP ist so strukturiert, dass die Antikörper Zellen oder Gewebe genauso effizient durchdringen wie reguläre HRP-konjugierte Sekundärantikörper. Das Verhältnis von Molarenzym/Antikörperprotein hat einen Durchschnittswert von '4'.

Reaktionsstopplösung: Wie bei jedem enzymbasierten Markierungssystem kann es zu einer Überentwicklung des Signals kommen. SuperBoost-Kits enthalten eine HRP-Stopplösung, um die HRP-Reaktion anzuhalten. HRP-Stopplösung kann verwendet werden, um ein maximales Signal zu erhalten, ohne das Hintergrundsignal zu erhöhen. Bilder, die mit optimierten HRP-Reaktionszeiten erstellt werden, sind genauso scharf wie Bilder, die mit Standard-ICC/IHC/ISH-Methoden erstellt werden, weisen jedoch eine um das 10- bis 200-Fache höhere Empfindlichkeit auf.

Reduzierung des Hintergrunds: SuperBoost Kits beinhalten Blocker zur Eliminierung oder Reduktion von endogener Peroxidase und fluoreszierenden Hintergrundsignalen. Diese Blocker tragen dazu bei, dass nur bestimmte Signale verstärkt werden, während nicht-spezifische und Hintergrundsignale überprüft werden.