Click-iT™ EdU Imaging Kit with Alexa Fluor™ 488, 594, and 647 Azides
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Click-iT™ EdU Imaging Kit with Alexa Fluor™ 488, 594, and 647 Azides

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Das Click-iT™ EDU Bildgebungskit ist eine Testversion unserer hervorragenden Alternative zu herkömmlichen Proliferationsassays, die für Fluoreszenzmikroskopie optimiert sind. Bei diesemWeitere Informationen
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KatalognummerMenge
C100861 Kit
Katalognummer C10086
Preis (EUR)
124,00
Each
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Menge:
1 Kit
Preis (EUR)
124,00
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Das Click-iT™ EDU Bildgebungskit ist eine Testversion unserer hervorragenden Alternative zu herkömmlichen Proliferationsassays, die für Fluoreszenzmikroskopie optimiert sind. Bei diesem Assay wird das geänderte Thymidin-Analogon EdU effizient in neu synthetisierte DNA integriert und mit einem hellen, lichtbeständigen Alexa Fluor™ Farbstoff in einer raschen, höchst spezifischen Click-Reaktion fluoreszenzmarkiert. Diese Fluoreszenzmarkierung proliferierender Zellen ist präzise und kompatibel mit Antikörper-Methoden aufgrund des schonenden Click-Protokolls. Dieses Testgrößen-Kit enthält ausreichend EDU, um bis zu 6 bis 30 Deckgläser und genug Alexa Fluor™ 488, 594 und 647 Azide zu markieren, um neue DNA-Synthese auf 2 bis 10 Deckgläsern mit jedem Fluorophor zu erkennen.
• Einfach—Funktioniert beim ersten Mal, jedes Mal und in kürzerer Zeit
• Effizient—Ohne Denaturierungsschritte oder raue Behandlung
• Aussagekräftige Ergebnisse—Bessere Erhaltung der Zellmorphologie, Antigen-Struktur und DNA-Integrität
•Konsistent—Unabhängig von veränderlichen Antikörperchargen für den Nachweis

Die genauesten Methoden für den Proliferationsnachweis basieren auf der Integration und Messung von Nukleosidanaloga in neu synthetisierter DNA, wobei Bromodeoxyuridin (BrdU) ein häufig verwendetes Analogon ist. BrdU-markierte DNA wird mit Anti-BrdU-Antikörpern nach der DNA-Denaturierung durch Eingriffe wie HCL, Hitze oder Enzyme zur Freilegung der BrdU-Moleküle quantifiziert. Dieser Schritt ist jedoch zeitaufwändig und dauerhaft kaum auszuführen. Eine raue Behandlung kann außerdem die Probenintegrität und -qualität beeinträchtigen, was eine Ko-Färbung mit anderen Antikörpern erschwert.

Überlegene Proliferationsmethodik
Der Click-iT™ EdU Bildgebungskit ist eine hervorragende Alternative zu BrdU-Assays für Messungen der Zellproliferation. EdU (5-Ethinyl-2'-Desoxyuridin) ist ein Nukleosid-Analogon von Thymidin und wird während der aktiven DNA-Synthese in DNA eingebunden. Mit Click-iT™ EdU sind eine schonende Fixierung und Permeabilisierung mit Lösungsmitteln ausreichend, damit das niedermolekulare Click-iT™ EdU-Detektionsreagenz Zugang zur DNA erhält. Das Click-iT™ EdU Bildgebungs-Kit ist deshalb nicht nur einfach anzuwenden, sondern präziser und kompatibel in der Zellzyklusanalyse und anderen intrazellulären oder extrazellulären Analysen und liefert höchst aussagekräftige Ergebnisse.

Dieses Kit ist für Anwendungen in der Fluoreszenzmikroskopie optimiert. Besuchen Sie den Bereich für die Click-iT™-Technologie auf unserer Website für Kits, die für High-Content-Bildgebung, Fluoreszenz-Mikrotiterplatten oder Durchflusszytometrie-Plattformen entwickelt wurden.

Weitere Informationen zur Click-iT™-Technologie

Hinweise:
Der Click-iT™ Assay eignet sich für Zellen in Kultur und in vivo, indem er nach der EdU-Zugabe mittels Zuführungs- oder Injektionsmethoden angewendet wird.
Der Click-iT™ Assay kann mit BrdU in Doppelpulsexperimenten verwendet werden, indem der Anti-BrdU (MoBu-1-Klon)-Antikörper verwendet wird, der nicht mit EdU kreuzreagiert.
Die Click-iT™-Technologie ist kompatibel mit immunhistochemischen, immunzytochemischen und Fluoreszenz-Farbstoffen, die fixierungstolerant sind oder für die Markierung von fixierten Zellen entwickelt wurden.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
ZelltypSäugetierzellen, Spermazellen, Fungalzellen, eukaryotische Zellen, Bakterien, Hefezellen
NachweisverfahrenFluoreszent, Fluoreszent
FarbstofftypAlexa Fluor™ 488, Alexa Fluor™ 594, Alexa Fluor™ 647
FormatDeckgläser, Deckgläser
Umweltfreundliche EigenschaftenWeniger gefährlich
Menge1 Kit
VersandbedingungRaumtemperatur, Raumtemperatur
FarbeGrün, fernrot, rot
EmissionSichtbar
Zur Verwendung mit (Geräte)Floid™ Zellbildgebungsstation, Fluoreszenzmikroskop, Fluoreszenz-Imager
ProduktlinieAlexa Fluor™, Click-iT™
ProdukttypBildgebungs-Kit
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Im Kühlschrank lagern (2 bis 8 °C).
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Zertifikate

Chargen-Nr.Certificate TypeDateCatalog Number(s)
2975904Certificate of Analysis23. Juli 2024C10086
2738399Certificate of Analysis09. Nov. 2023C10086
2566208Certificate of Analysis29. März 2023C10086
2491419Certificate of Analysis06. Juli 2022C10086
2295055Certificate of Analysis11. Okt. 2021C10086
5 Ergebnisse angezeigt, oben nach einem bestimmten Zertifikat suchen

Sicherheitsdatenblätter

Informationen zu Lizenzbestimmungen

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Limited Use Label License No. 402: Nucleic acid labeling and detection
Notice to Purchaser: If end-user or third party is interested in a commercial license, it should contact Harvard's Office of Technology Development, 1350 Massachusetts Avenue, Holyoke Center, Suite 727, Cambridge, MA 02138, (617) 495-3067.

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Häufig gestellte Fragen (FAQ)

Click reactions have several general characteristics: the reaction is efficient, no extreme temperatures or solvents are required, the reaction is complete within 30 minutes, the components of the reaction are bio-inert, and perhaps most importantly, no side reactions occur-the label and detection tags react selectively and specifically with one another. This final point is a key advantage of this powerful detection technique; it is possible to apply click chemistry-labeled molecules to complex biological samples and detect them with unprecedented sensitivity due to the extremely low background of the reaction.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

One may store the sample after fixation overnight in PBS at 4oC. For longer storage (<1 week) , store in buffer with 1-2% formaldehyde or in formalin to limit microbial growth. If you use sodium azide as a microbial inhibitor, it must be completely removed prior to the Click-iT reaction.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Viability, Proliferation, Cryopreservation, and Apoptosis Support Center.

The problem is likely not the Alexa Fluor 594 azide. Since there are no alkynes endogenous to mouse tissue, there is nothing for the dye-azide to bind to. Since the background doesn't overlap with nuclei (DAPI signal), this isn't an issue of unintended EdU labeling. This red is autofluorescence from red blood cells; they autofluoresce in the red and don't have nuclei. This can be confirmed by checking a completely unlabeled tissue section (no dye present at all) to see if they are still present and by examining the cells at high magnification and looking for corpuscular shape.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

We do not recommend using phalloidin conjugates for staining actin in combination with traditional Click-iT or Click-iT Plus reactions since phalloidin is extremely sensitive to the presence of copper.

For staining actin in combination with traditional Click-iT or Click-iT Plus reactions, we recommend using anti-α-actin antibodies for staining actin in the cytoskeleton. You can find a list of our actin antibodies here.

Another option would be to use the Click-iT Plus Alexa Fluor Picolyl Azide Toolkit (Cat. Nos. C10641, C10642, C10643). These Click-iT Plus toolkits provide Copper and Copper protectant separately which makes it easier to titrate the copper concentration to obtain optimal labeling with minimal copper-mediated damage. You may need to optimize the click reaction with the lowest possible concentration of copper and then perform the phalloidin staining.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Yes, but the standalone products are not shipped at the same amount as provided in the Click-iT EdU kits; the amount of dye-azide provided in the Click-iT kits is proprietary information. See these catalog numbers for the stand alone products:
- Cat. No. A10266: Alexa Fluor 488 azide
- Cat. No. A10270: Alexa Fluor 594 azide
- Cat. No. A10277: Alexa Fluor 647 azide

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Zitierungen und Referenzen (10)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
Outcompeting p53-Mutant Cells in the Normal Esophagus by Redox Manipulation.
Authors:
Journal:Cell Stem Cell
PubMed ID:31327664
Translational control by DHX36 binding to 5&#39;UTR G-quadruplex is essential for muscle stem-cell regenerative functions.
Authors:
Journal:Nat Commun
PubMed ID:34413292
Zika Virus Targets Glioblastoma Stem Cells through a SOX2-Integrin αvβ5 Axis.
Authors:
Journal:Cell Stem Cell
PubMed ID:31956038
The transcription factor NF-Y participates to stem cell fate decision and regeneration in adult skeletal muscle.
Authors:
Journal:Nat Commun
PubMed ID:34650038
Mutant clones in normal epithelium outcompete and eliminate emerging tumours.
Authors:
Journal:Nature
PubMed ID:34646013
10 total citations

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