Markierte Dextrane sind hydrophile Polysaccharide, die häufig in mikroskopischen Studien zur Überwachung der Zellteilung, zum Verfolgen der Bewegung von lebenden Zellen und zur Untersuchung der hydrodynamischen Eigenschaften der zytoplasmatischen Matrix verwendet werden. Markiertes Dextran wird häufig per Mikroinjektion in die Zellen eingebracht.
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Dextran-Spezifikationen:
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Markierung (Anregung/Emission): Tetramethylrhodamin & Biotin (555/580)•
Größe: 3.000 MW•
Ladung: Anionisch•
Fixierbar: Mit Lysin fixierbarHohe Fertigungsstandards für Molecular Probes™ DextransWir bieten über 50 fluoreszierende und biotinylierte Dextran-Konjugate in mehreren Molekulargewichtsbereichen an. Dextrane sind hydrophile Polysaccharide, die sich durch ein mittleres bis hohes Molekulargewicht, eine gute Wasserlöslichkeit und geringe Toxizität auszeichnen. Zusätzlich weisen sie im Allgemeinen eine niedrige Immunogenität auf. Dextrane sind biologisch inert aufgrund ihrer ungewöhnlichen Poly-(α-D-1,6-Glucose)-Bindungen, die eine Spaltung durch die meisten endogenen zellulären Glykosidasen verhindern.
In den meisten Fällen sind die fluoreszierenden™ In den meisten Fällen leuchten fluoreszierende Molecular Probes Dextrane viel heller und haben eine höhere negative Ladung als Dextrane anderer Lieferanten. Darüber hinaus verwenden wir strikte Verfahren zur Entfernung von so viel unkonjugiertem Farbstoff wie praktisch möglich und testen unsere Dextran-Konjugate anschließend mittels Dünnschichtchromatographie, um sicherzustellen, dass keine Kontaminanten mit niedrigem Molekulargewicht vorhanden sind.
Eine breite Auswahl an Substituenten und MolekulargewichtenMolecular Probes™ Dextrane sind mit Biotin oder einer Vielzahl von Fluorophoren konjugiert, darunter sieben unserer Alexa Fluor™ Farbstoffe (
Molecular Probes Dextran-Konjugate – Tabelle 14.4), und in folgenden nominalen Molekulargewichten (MW) erhältlich: 3.000; 10.000; 40.000; 70.000; 500.000 und 2.000.000 Dalton.
Dextran Nettoladung und FixierbarkeitWir verwenden die Succinimidyl-Kopplung unserer Farbstoffe an das Dextran-Molekül. Dies führt in den meisten Fällen zu einem neutralen oder anionischen Dextran. Die bei der Herstellung der Rhodamin Green™ und Alexa Fluor
™ 488 Dextrane verwendete Reaktion ergibt ein neutrales, anionisches oder kationisches Endprodukt. Die Alexa Fluor
™, Cascade Blue
™, Lucifer Yellow, Fluorescein und Oregon Green
™ Dextrane sind an sich anionisch, während die meisten Dextrane, die mit den zwitterionischen Farbstoffen Rhodamin B, Tetramethylrhodamin und Texas Red™ markiert werden, im Wesentlichen neutral sind. Um mehr hoch anionische Dextrane zu produzieren, haben wir ein geschütztes Verfahren entwickelt, um an den Dextranträger negativ geladene Gruppen hinzuzufügen; diese Produkte werden als “polyanionische” Dextrane bezeichnet.
Bei einigen Anwendungen muss die Dextran-Markierungssubstanz vor der Analyse mit Formaldehyd oder Glutaraldehyd behandelt werden. Für diese Anwendungen bieten wir “Lysin-fixierbare” Versionen der meisten unserer Dextran-Konjugate mit Fluorophoren oder Biotin. Diese Dextrane besitzen kovalent gebundene Lysin-Reste, die die Bindung der Dextran-Tracer an umgebende Biomoleküle durch eine Aldehyd-vermittelte Fixierung mit umliegenden Biomolekülen und hierdurch den nachfolgenden Nachweis durch immunhistochemische und ultrastrukturelle Verfahren ermöglicht. Wir haben auch gezeigt, dass alle unsere 10.000 MW Alexa Fluor
™ Dextran-Konjugate mit aldehydbasierten Fixiermitteln fixierbar sind.
Hauptanwendungen für markierte DextraneIn der Fachliteratur wird eine Vielzahl von Anwendungsfällen für markierte Dextrane beschrieben. Zu den häufigsten Anwendungen gehören:
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Neuronales Tracing (anterograd und retrograd) in lebenden Zellen•
Zelllinienverfolgung in lebenden Zellen•
Neuroanatomisches Tracing•
Untersuchung interzellulärer Kommunikationswege (z. B von Gap Junctions, während der Wundheilung und bei der embryonalen Entwicklung)•
Untersuchung der vaskulären Permeabilität und der Integrität der Blut–Hirn-Schranke•
Verfolgung von Endozytose•
Überwachung der Azidifikation (einige Dextran–Farbstoffkonjugate sind pH-empfindlich)•
Untersuchung der hydrodynamischen Eigenschaften der zytoplasmatischen MatrixNur für Forschungszwecke. Nicht für therapeutische oder diagnostische Zwecke an Tieren und Menschen vorgesehen.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.