Exonuklease I (ExoI) degradiert einsträngige DNA in einer 3‘→5'-Richtung. Gibt Desoxyribonukleosid-5'-Monophosphate schrittweise frei und lässt 5'-terminale Dinukleotide intakt.
Es spaltet keine DNA-Stränge mit terminalen 3'-OH-Gruppen, die durch Phosphoryl- oder Acetylgruppen blockiert sind.
Highlights
• aktiv in PCR-Puffern
Anwendungen
• Primer-Entfernung aus PCR-Gemischen:
• vor der PCR-Produktsequenzierung
• für die Ein-Röhrchen-„Megaprimer“-PCR-Mutagenese
• Entfernung von einzelsträngiger DNA, die ein 3'-Hydroxyl-Ende aus Nukleinsäure-Gemischen enthält
• Assay für den Nachweis einer einzelsträngigen DNA mit einem 3'-Hydroxylende
Hinweis
Das Enzym eignet sich nicht zum Entfernen von 3'-Überhängen von dsDNA.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.